操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
MKC3946 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | FS-X10951 |
產(chǎn)品介紹:
MKC3946是一種有效的IRE1α抑制劑,常用于癌癥研究。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):1093119-54-0 純度:99.77% 分子量:380.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
運(yùn)動(dòng)?xùn)|秀珠氏菌人鈣聯(lián)蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β萘(β-Nph)
竹黃*人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)
賴芽孢桿菌人βBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)
鼠乳桿菌人胎球蛋白ABacillus subtilis subsp. subtilis小鼠疊氮胸(AZT)
釀酒酵母人胎盤核糖核抑止劑Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠疊氮胸(AZT)
小馬勃人胎盤蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β葡糖(β-glucosidase)
可可毛色二孢菌人胎盤催乳Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β葡糖(β-glucosidase)
紫穗槐根瘤菌人胎兒血紅蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠多巴(DA)
藤黃微球菌人抗巨病抗體IgMBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠多巴(DA)
不解糖單胞菌人抗弓形體IgM抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)
黃柄籠頭菌人抗風(fēng)疹病IgG抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)
擬莖點(diǎn)霉人抗EB病抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠高敏甲狀腺(u-T4)
假紅桿菌屬人孕受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠高敏甲狀腺(u-T4)
多根硬皮馬勃人新生兒促甲狀腺Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β葡萄糖(βGD)
巨孢犁頭霉人特異性β1糖蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β葡萄糖(βGD)
Bionectria 人胎盤泌乳Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)
鋅指蛋白146抗體炭球菌秋行軍蟲卵巢細(xì)胞Sf9克株
乳腺癌相關(guān)基因2抗體鋅指蛋白364杏鮑菇牛trim5α基因沉默細(xì)胞株
細(xì)胞周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體金龜子綠僵菌幼倉鼠腎傳代細(xì)胞
鋅指蛋白420抗體白僵菌永生化滇西亞種樹鼩肝細(xì)胞
IRE1α抑制劑(MKC3946)四川散斑殼 2-羥基吡啶成纖維生長(zhǎng)因子23
檸檬明串珠 三氟乙酰酮辣椒受體5
野油菜黃單胞棲青莧致病變種 2-氟苯乙酮飽和脂肪
科羅拉多擬無枝 二苯甲酮過氧化物
Brenneria salicis 芐酮維生E
新疆交替紅色桿 苯乙酮雪卡
Lonsdalea quercina subsp. quercina 異佛爾酮空泡
局限曲霉 硅鈉甲狀腺受體α
頭孢霉屬 無水磷鈉甲狀腺受體β
叢赤殼屬 原釩鈉甲狀腺球蛋白
矩圓黑盤孢 亞硝基鐵化鈉組織蛋白B
葡萄座腔 三偏磷鈉7-芐氧基-4-三氟甲基-脫芐基
白色假絲酵母* 偏磷鈉αS轉(zhuǎn)移
根瘤 偏鈉膜攻擊復(fù)合物
假單胞 偏重亞硫鈉球蛋白