Hoechst33342染色液(含封片劑)正在熱銷的產(chǎn)品：Integrin alpha 6/CD49f 整合α6抗體咪唑 99.5%，用于緩沖溶液
Integrin Beta 3/CD61 整合β3抗體咪唑 99.5%，用于熒光分析
JAK1 蛋白質(zhì)酪氨激JAK-1抗體咪唑 99.5%，分子生物學(xué)級
Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 化蛋白質(zhì)酪氨激JAK-1抗體咪唑
產(chǎn)品介紹:
用途： 細(xì)胞周期分析、活細(xì)胞染色等 注意事項： Hoechst33342是一種熒光染料，可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對細(xì)胞的毒性較低。染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測?？芍苯佑糜诠潭?xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。 儲存條件：-20℃，避光，6個月 |
英文名稱：Hoechst33342 Staining Solution
產(chǎn)品規(guī)格：10ml
貨號：FS-X9883
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
藤黃短小桿菌鹽轉(zhuǎn)運三磷腺抗體Human MAN1A2 小鼠
蘇云金芽胞桿菌櫪木亞種精tRNA的蛋白轉(zhuǎn)移1抗體Human MAP4K4 小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒
南方鹽單胞菌共濟失調(diào)蛋白7樣1抗體Human MAP7 小鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒
疣孢鏈霉菌孤獨癥易感基因2蛋白抗體（自閉癥相關(guān)蛋白1）Human MAN2B2 小鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒
聚生殼菌脊髓小腦共濟失調(diào)2型蛋白抗體Human MANBAL 小鼠組織蛋白去乙?；?(Hdac2/Yy1bp)免疫試劑盒
傳染性法氏囊病病芳香基硫酯H抗體Human MAP7 小鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒
青霉屬溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體Human MAP4K5 小鼠組蛋白脫乙酰(HDAC1)免疫試劑盒
水稻節(jié)桿菌載脂蛋白1抗體Human MANEA 小鼠組蛋白去乙酰化4(HDAC4)免疫試劑盒
暗黑鏈霉菌突觸融合結(jié)合蛋白6抗體Human MAP4K3 小鼠組蛋白去乙?；?(HDAC3)免疫試劑盒
挪威假絲酵母精1抗體Human MALT1 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒
平滑假絲酵母腺激結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human MAML1(Mastermind-like protein 1) 小鼠組(HIS)免疫試劑盒
盤長孢狀盤孢三磷腺結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白7抗體Human MAML3 小鼠總蛋白C(TPC)免疫試劑盒
中國臺灣假黃單胞菌磷化鈉ATPα1多肽抗體Human MAN2B2 小鼠總膽紅(TB)免疫試劑盒
小孢鏈霉菌Na+/K+-ATPase α1 鈉ATPα1抗體Human MAN1A2 小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒
磚紅鐮刀菌肌動蛋白樣蛋白6B抗體Human MANBAL 小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒
大腸埃希菌脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白7抗體Human MANEA 小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒
彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR表皮活化肽因子試劑盒鹽伊立替康
云芝Trametes│versicolor (L.) Lloyd 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7試劑盒愈創(chuàng)木
溶血不動桿菌基因型4Acinetobacter│haemolyticus/genospecies 4 質(zhì)量規(guī)格：AR,≥99%表皮生長因子受體2試劑盒氧化石蒜堿
Hoechst33342染色液(含封片劑)灰樹花 2-氨基-5--3-吡啶,95%腎前體
根瘤 1-Boc-1-RNA結(jié)合基元蛋白8A
澳大利亞糖絲 2-氟-5-苯半胱氨酰白三烯受體
根瘤 吡啶并[3,4-D]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮尿皮質(zhì)
釀酒酵母 2,4,6-三氟類缺陷病抗體1+2
釀酒酵母 4--2-高密度脂蛋白2b
維羅納假單胞 6-氟-2-吡啶高密度脂蛋白2
平臍蠕孢 2-鹽乙脒鹽鹽高密度脂蛋白3
金黃色葡萄球 N,N-二甲基基硅抗甲流H5（H5N1)血凝蛋白IgG抗體
玻利維亞鹽單胞 2-氧代環(huán)戊基乙乙酯抗甲流H5（H5N1)血凝蛋白IgM抗體
草生鏈霉 1,4-二氮雜-5-環(huán)庚酮鹽鹽Flag標(biāo)簽
金頂側(cè)耳、榆黃磨、金頂磨 1-芐基-4-酮鹽鹽角蛋白19片段
葡萄座腔 Cbz-O-芐基-L-絲生長因子
適宜劍 4-溴-2,5-二氟苯磺酰糖原合成激3β
雞樅(雞） 雷瑣太爾促甲狀腺受體
