GEHMT2和EHMT1抑制劑正在熱銷的產(chǎn)品：CNTF(Ciliary Neurotrophic Factor) 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原霉 98%
factor V(Vcoagulation factor) 5抗體2--3-硝吡啶 >99.0% (HPLC)
Collagen III (Collagen Type III ) 抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)三(五氟苯)烷 97
中文名稱：GEHMT2和EHMT1抑制劑
英文名稱：UNC0638
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10527
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：UNC0638 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg UNC0638是一種有效的G9a(EHMT2)(IC50<15nM)和GLP(EHMT1)(IC50=19nM)抑制劑。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1255580-76-7 純度：98.60% 分子式：C??H??N?O? 分子量：509.73 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
泡盛曲霉酪相關(guān)蛋白1抗體Anti-IL7R Antibody松弛肽(RLN)
灰銹赤鏈霉菌推定NFκB激活蛋白20抗體Anti-ING1 Antibody松弛/胰島樣肽受體3(RXFP3)
釀酒酵母Src激活和信號分子蛋白抗體Anti-INA Antibody松弛/胰島樣肽受體1(RXFP1)
野別樣希瓦氏菌腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白6結(jié)合蛋白抗體Anti-INPP5D Antibody四旋蛋白9(TSPAN9)
科貝特氏菌屬B淋巴基因1抗體Anti-INHA(Inhibin α) Antibody四旋蛋白8(TSPAN8)
紅色紅菇T活化連接蛋白抗體Anti-Inhibin alpha/INHA Antibody四旋蛋白7(TSPAN7)
青紫鏈霉菌轉(zhuǎn)錄共激活因子TAZ抗體Anti-INPPL1 Antibody四旋蛋白6(TSPAN6)
多主葡萄殼菌凝血(II)輕鏈抗體Anti-Insig1 Antibody四旋蛋白5(TSPAN5)
維氏紅細菌凝血(II)激活肽1抗體Anti-INSR Antibody四旋蛋白4(TSPAN4)
靈芝(紅芝, 赤芝)凝血(II)激活肽2抗體Anti-INSR Antibody四旋蛋白30(TSPAN30)
球孢白僵菌Tafazzin蛋白抗體Anti-Integrin alpha V/ITGAV Antibody四旋蛋白3(TSPAN3)
圣保羅沙門氏菌TEC酪激蛋白抗體Anti-Integrin beta 4/ITGB4 Antibody四旋蛋白27(TSPAN27)
鹽反硝化枝芽孢桿菌鈣轉(zhuǎn)運蛋白1抗體Anti-Integrin beta 5/ITGB5 Antibody四旋蛋白2(TSPAN2)
綠色粘帚霉金屬蛋白組織抑制因子-2抗體Anti-IQGAP1 Antibody四旋蛋白1(TSPAN1)
腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體Anti-IQGAP1 Antibody四加半LIM域蛋白1(FHL1)
高地芽孢桿菌腫瘤壞死因子配體超家族成員9抗體Anti-IQGAP2 Antibody死亡誘導(dǎo)終結(jié)因子1(DIDO1)
SLU7蛋白抗體緩慢葡萄球菌小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞
絲/蘇蛋白磷3B抗體食菌屬小鼠肺泡巨噬細胞
絲/蘇激25抗體噬瓊膠海水菌小鼠小腦顆粒細胞
絲蛋白抑制劑A10抗體梭形芽孢桿菌屬小鼠神經(jīng)元細胞
GEHMT2和EHMT1抑制劑淡紫擬青霉 癸二E選擇
麥根腐平臍蠕孢 3-溴-4-氟FMS樣酪激3
黑曲霉 2-乙基苯肼 鹽鹽MAX二聚化蛋白1
枯草芽孢桿 噻吩-2-頻哪酯Mx基因
枯草芽孢桿 Fmoc-L-beta-高苯N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖
皺紋單胞 Fmoc-L-beta-高異亮S100B蛋白
白葉枯病* Fmoc-3-L-氨基丁Toll樣受體4
鑲邊鏈霉 FMOC-L-β-高亮Toll樣受體7
葡萄座腔 (S)-1-Fmoc--3-甲T亞群
大腸桿 Fmoc-L-3-吖丁啶羧α干擾
枯草芽孢桿 苯乙烯-D8β干擾
穗狀平臍蠕孢 2,3,4-三氟甲苯γ氨基丁
同心環(huán)青霉 2,5-二氟苯γ干擾
粉肉擬層孔 四聚乙二單辛白蛋白
大腸埃希氏 1-Boc-3-氨基吖丁啶白分化抗原4
