DOT1L抑制劑(EPZ004777)正在熱銷的產(chǎn)品：Nm23(NDP Kinase A,NDPKA) 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因抗原苯 ACS, ≥99.0%
Nm23-H1 (nucleoside dIPhosphatase kinase A) 腫瘤抑制因抗原苯 AR,99%
Nogo-B/A 軸索過度生長抑制因子-B/A抗原無水 AR，98%
NOS-2 peptide 一氧化氮合成-2多肽抗原
中文名稱：DOT1L抑制劑(EPZ004777)
英文名稱：EPZ004777
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10573
產(chǎn)品介紹:
EPZ004777是一種有效的選擇性DOT1L抑制劑，IC50為0.4nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1338466-77-5 純度：99.89% 分子量：539.67 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
巴奈特酵母快速發(fā)育生長因子同源蛋白2抗體Anti-NTRK1 Antibody卵質(zhì)1(OVCH1)
煙管菌SPNS1抗體Anti-NTRK1 Antibody卵泡抑樣蛋白1(FSTL1)
布氏白僵菌（卵孢白僵菌）跨膜蛋白SEMA4A抗體Anti-NTRK1 Antibody卵泡激受體(FSHR)
枯草芽胞桿菌突觸相關(guān)蛋白23抗體Anti-NTRK2 Antibody膽固脂酰轉(zhuǎn)移(LCAT)
釀酒酵母突觸相關(guān)蛋白97抗體Anti-NTRK2 Antibody卵巢濾泡激(FLCN)
大腸桿菌神經(jīng)囊泡循環(huán)蛋白2抗體Anti-NTRK2 Antibody龍蝦肽樣金屬內(nèi)肽(ASTL)
磚紅鐮刀菌突觸相關(guān)蛋白29抗體Anti-NTRK3 Antibody瘤變抑制因子14(ST14)
紅緣擬層孔菌突觸相關(guān)蛋白25結(jié)合蛋白抗體Anti-NUCB2 Antibody硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2(TBP2)
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種突觸泡蛋白2B抗體Anti-NTRK3 Antibody硫氧還蛋白還原3(TrxR3)
紫晶臘蘑突觸泡蛋白2C抗體Anti-NUMB Antibody硫氧還蛋白還原2(TrxR2)
史氏芽胞桿菌突觸囊泡蛋白抗體Anti-NUP214 Antibody硫氧還蛋白還原1(TrxR1)
Sphingopyxis ummariensis 胞吐分泌蛋白Sec8抗體Anti-NUP214 Antibody硫氧還蛋白1(SRXN1)
泡盛曲霉分化蛋白SEPT6抗體Anti-NUP98 Antibody硫酯2(SULF2)
釀酒酵母多配體聚糖結(jié)合蛋白1抗體Anti-OAS3 Antibody硫酯1(SULF1)
釘斑鏈霉菌磷肌磷蛋白INPP5G抗體Anti-Occludin/OCLN Antibody硫皮膚差向異構(gòu)(DSE)
根瘤菌磷肌磷蛋白INPP5H抗體Anti-OCLN Antibody硫肝蛋白聚糖2(HSPG2)
氧化固結(jié)合蛋白8抗體Corynebacteriumamycolatum人子宮頸上皮細胞提取物
少突膠質(zhì)細胞轉(zhuǎn)錄因子1西宮皮生球菌人胚胎絨毛膜細胞提取物
腫瘤/睪丸抗原117胺胨羅斯氏菌人胚胎滋養(yǎng)層細胞提取物
土霉抗體Sphingobiumsuberifaciens人胎盤羊膜細胞提取物
DOT1L抑制劑(EPZ004777)芽枝狀枝霉 環(huán)庚甲一氧化氮合
輪蟲弧 (R)-(+)-1,1-聯(lián)萘-2-甲氧基-2-二苯膦X型膠原蛋白
運動膠杜搟氏 3-溴-2-甲基烯甲胎蛋白
鼠李糖乳桿 二乙酰二(三苯基膦)鈀胰高血糖樣肽2
奇異球 替卡格雷中間體44,6-二-2-(硫基)-5-氨基嘧啶，卵泡受體
矩圓黑盤孢 格列奈S轉(zhuǎn)移α
平菇 1-壬硫環(huán)氧化合物水解1
黃孢平革 3-并噻吩中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白
遲鈍愛德華氏 1-十七烷總超氧化物歧化
側(cè)耳 6-溴-1-茚滿酮C-反應蛋白
PL20（雙抗黑平） 6--1-茚酮黃體生成
加利福尼亞接合擬威爾酵母 1-芐基-3-乙氧羰基-4-酮鹽鹽轉(zhuǎn)鈷蛋白Ⅰ
大豆慢生根瘤 6-溴-4-羥基喹啉鐵調(diào)
球孢白僵 4-(乙基硫代)苯骨形成蛋白6
*櫻桃鏈格孢 2-己基磺酰全反鈷
