Nrf-2激活劑(Bardoxolone)正在熱銷的產(chǎn)品：Batroxobin Protein 蛇巴曲全蛋白正酯 AR,99.0%
Leptin 瘦（抗原)氧化鋁 AR
Lpin1 protein Lpin1 protein(抗原)氧化鋁 99.6%，1μm
Lumbrokinase 蚯蚓纖溶(蚓激抗原)氧化鋁 99.8%,10μm,,高白度
Livin (Inhibitors o
英文名稱：Bardoxolone
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10615
產(chǎn)品介紹:
Bardoxolone是一種新型核調(diào)節(jié)因子(Nrf-2)激活劑。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：218600-44-3 別名：CDDO;RTA 401 純度：99.21% 分子量：491.66 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
大腸埃希氏菌FITC標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SFTPD Antibody核糖體蛋白L6(RPL6)
豌豆根瘤菌FITC標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SFTPB Antibody核糖體蛋白L23A(RPL23A)
光帽鱗傘膠體金標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SFTPA1 Antibody核糖體蛋白L13A(RPL13A)
PX459 V2.0FITC標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SFTPA1/2 Antibody(PB0433)核糖激(RBKS)
異常畢赤酵母辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SGCA Antibody核糖核抑制因子(RI)
玫瑰黃鞘單胞菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SGK1 Antibody核糖核外切3(ERI3)
運(yùn)動節(jié)桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SGK1 Antibody核糖核外切2(ERI2)
大腸埃希氏菌PE標(biāo)記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-SGK1 Antibody核糖核外切1(ERI1)
野土地桿菌辣根過氧化物標(biāo)記兔抗人IgAAnti-SHANK3 Antibody核糖核T2(RNASET2)
魯酵母生物標(biāo)記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-SHBG Antibody核糖核P(RNASEP)
棒桿菌屬生物標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SHC1 Antibody核糖核L(RNASEL)
Bacillus aryabhattai生物標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SHFM1 Antibody核糖核K(RNASEK)
釀酒酵母生物標(biāo)記的兔抗人分泌型IgAAnti-SHH Antibody核糖核H(RNASEH)
埃及枝頂孢生物標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SHC1 Antibody(PB0435)核糖核A9(RNASE9)
香草蘭根疾Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SHMT1 Antibody核糖核A8(RNASE8)
黃桿菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SHISA7 Antibody核糖核A7(RNASE7)
核纖層蛋白A識別因子抗體Bacillussubterraneus大鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物
中性鞘磷脂2抗體Helcococcuskunzii大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞提取物
核受體蛋白NR2E1抗體脫葉鏈霉菌大鼠心肌細(xì)胞提取物
N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體梭菌屬大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
Nrf-2激活劑(Bardoxolone)多形布勒擔(dān)子酵母 硅烷基 2,2-二氟-2-(氟磺酰)醋鹽媾疫錐蟲抗體
香菇(L988) 9-吖啶尼帕病抗體
地衣芽孢桿 2-氨基嘧啶-5-甲非酯化脂肪
盤長孢狀盤孢 5-降烯-2-羧馬心脂肪結(jié)合蛋白
蠟蚧 N-Boc-1-氨基環(huán)丁烷羧馬結(jié)合珠蛋白；觸珠蛋白
IBV M41 HAR/HI serum 陽性血清（荷蘭引進(jìn)） 4,6-二甲基二苯并噻吩輔肌動蛋白α1
間型串珠鐮孢 納碳化鋯輔肌動蛋白α2
昆明鏈霉 碳化鎢轉(zhuǎn)錄激活因子-1
蘇云金芽孢桿蘇云金亞種 碳化鈦(粉末)轉(zhuǎn)錄激活因子-2
根瘤 碳化鉭磷脂酰肌蛋白聚糖1
唐菖蒲青霉 碳化鈮磷脂酰肌蛋白聚糖4
冷變紫薄層 碳化鉿絡(luò)絲蛋白
粉紅單端孢霉 堿式碳銅緊密連接蛋白
就地堆肥地芽孢桿 硒化鉍(III)組織因子
克魯維畢赤酵母克魯維變種 五氧化三鈦組織因子途徑抑制物
