操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
CCT245737 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | FS-X10610 |
產(chǎn)品介紹:
CCT245737是一個(gè)強(qiáng)的,ATP競(jìng)爭(zhēng)的CHK1抑制劑,IC50值是30-220nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):1489389-18-5 純度:99.17% 分子量:379.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
粉紅擲孢酵母生物標(biāo)記的驢抗羊IgGAnti-SATB1 Antibody肌單磷1(IMPA1)
慢生根瘤菌生物標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SATB1 Antibody肌脫氫(SARDH)
總狀橫梗霉PE-CY5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-SCEL Antibody饑餓-O-乙酰基轉(zhuǎn)移(GOAT)
人蒼白桿菌PE標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SBCAD/ACADSB Antibody饑餓/肥胖抑制前激原(GHRL)
芽孢桿菌PE-Cy7標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SATB1 Antibody饑餓(GHRL)
蘇云金芽孢桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGAnti-SCARB1 Antibody(PB0531)活性依賴性神經(jīng)保護(hù)因子(ADNP)
乳微桿菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCG3 Antibody活性氧物種調(diào)節(jié)因子1(ROMO1)
黃河張比齊奧氏菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCGB1A1 Antibody活化T-核因子2(NFATC2)
生活飲用水 氟生物標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGAnti-SCGB1A1 Antibody回腸脂肪結(jié)合蛋白(FABP6)
黑曲霉Cy5標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCN11A Antibody恢復(fù)蛋白(RCVRN)
釀酒酵母PE-Cy3標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCN1A Antibody黃體激(LH)
半園田頭菇APC標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCLY Antibody脫氫(XDH)
雞傷門氏菌PE標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCN1B Antibody緩激肽(BK)
嗜熱脂肪地芽孢桿菌Cy3標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCN1B Antibody環(huán)指蛋白39(RNF39)
短桿狀馬賽菌Cy5.5標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCN4B Antibody環(huán)指CCCH-型鋅指蛋白域蛋白1(RC3H1)
白馬勃Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCNN1A Antibody環(huán)氧化合物水解4(EPHX4)
神經(jīng)細(xì)胞粘附分子2抗體土耳其凸臍孢菌大鼠肺成纖維細(xì)胞提取物
軸突蛋白1β/Neurexin1β抗體酵面假單胞菌(酵面黃桿菌)大鼠支氣管成纖維細(xì)胞提取物
NIPAL2蛋白抗體木耳(斜面)大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子HNT抗體灰樹(shù)花(斜面)大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞提取物
CHK1抑制劑(CCT245737)構(gòu)巢曲霉 BIS-TRIS 鹽鹽傳染性貧血抗體
傳染性喉氣管炎病 2,2'-二喹啉-4,4'-二羧前列腺F2α
鏈霉 N-Boc-4-甲甲酯鼻疽
波羅的海西瓦氏 正壬布魯氏
短小芽孢桿 2-氟-3(三氟甲基)苯傳染性鼻肺炎
枯草芽孢桿 脫乙酰殼多糖溶
熱淀粉鏈霉 N-Boc-4-甲弓形蟲IgG
慢生根瘤 N,N′-二苯基-N,N′-(1-萘基)-1,1′-聯(lián)苯-4,4′-二褪黑
pMD2.G 4-溴-2,6-二氟苯多巴
日本山茶盤孢 2,6-二氟-4-甲氧基色C
微小桿 2,6-二氟-4-羥基苯CD40配體
節(jié)桿 乙酰皮質(zhì)
水稻漢納酵母 (R)-(-)-4-磺縮水甘油酯前列腺E2
根霉 己烯酯I型膠原蛋白
玫紅假裸囊 己乙酯雌三