γ-分泌酶抑制劑(YO-01027)正在熱銷的產(chǎn)品：大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA Kit 大鼠癌標(biāo)志物-CA153化鉍 99.99% metals basis
大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA Kit 大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199化鎘 AR,99.5%
HO-1 ELISA Kit 大鼠血紅氧合1代異丁烷 97%
PL-A2 ELISA Kit 大鼠脂A2五氧化二 AR,98%
中文名稱：γ-分泌酶抑制劑(YO-01027)
英文名稱：YO-01027
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg
貨號：FS-X10943
產(chǎn)品介紹:
YO-01027(Dibenzazepine;DBZ)是高效的γ-分泌酶抑制劑，裂解Notch和APPL的IC50分別為2.92±0.22和2.64±0.30nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：209984-56-5 別名：Dibenzazepine;DBZ 純度：98.22% 分子量：463.48 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
膠孢人ras同源物基因家族成員bLysinibacillus sphaericus小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)
團(tuán)炭角菌人假定蛋白LOC677340Bacillus sp.小鼠羥脯(Hyp)
紫色直絲鏈霉菌人假定蛋白LOC433328Bacillus sp.小鼠羥脯(Hyp)
鏈格孢菌人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88Lysinibacillus sphaericus小鼠骨保護(hù)配體(OPGL)
果生鏈核盤菌人干擾活化基因205Lysinibacillus sphaericus小鼠骨保護(hù)配體(OPGL)
擬盤多毛孢人組織相容性2-K1-K 區(qū)Lysinibacillus sphaericus小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)
兔出血癥病人白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4Lysinibacillus sphaericus小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)
假單孢菌人C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員ELysinibacillus sphaericus小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)
蘇云金芽孢桿菌人假定蛋白LOC677168Lysinibacillus sphaericus小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)
Malassezia cuniculi人淋巴抗原6復(fù)合物基因座ALysinibacillus sphaericus小鼠鐵蛋白(FE)
褐囊蜜環(huán)菌人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員1Lysinibacillus sphaericus小鼠鐵蛋白(FE)
釀酒酵母人混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域Lysinibacillus sphaericus小鼠碳酐2(CA-2)
固氮菌人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1αLysinibacillus sphaericus小鼠碳酐2(CA-2)
豇豆慢生根瘤菌人類似cDNA順序BC027382Lysinibacillus sphaericus小鼠色上皮衍生因子(PEDF)
松口蘑人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因Lysinibacillus sphaericus小鼠色上皮衍生因子(PEDF)
詹氏桿菌人REST協(xié)阻抑因子3Lysinibacillus sphaericus小鼠解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)
鋅指蛋白X染色體蛋白抗體暗褐網(wǎng)柄牛肝菌草魚魚鰾上皮樣細(xì)胞系
鋅指蛋白744抗體小克銀漢霉表達(dá)HP6H8抗體的中國倉鼠卵巢細(xì)胞株
鋅指蛋白ZBBX抗體酒香酵母牛甲狀腺細(xì)胞系
鋅指蛋白575抗體疣孢青霉猴胎腎細(xì)胞
γ-分泌酶抑制劑(YO-01027)黑木耳 二苯并噻吩三磷腺
異配囊接霉卵孢變種 磺苯甲?；青奏?/span>
西溪土土地桿 磺乙酰鈉單不飽和脂肪
豌豆根瘤 磺二甲氧嘧啶多不飽和脂肪
鍺栓孔 2,6-二苯脂聯(lián)
黑曲霉 苯佐抵抗
類芽孢桿屬 去甲替林鹽鹽膽囊收縮
產(chǎn)黃青霉 鹽阿替林甘油三酯
阿爾賓娜鞘氨單胞 1-氨基環(huán)烷羧高密度脂蛋白
空腸彎曲桿* 4-松油低密度脂蛋白
芽胞桿 泰妙游離脂肪
根瘤 麥芽五糖糖化血紅蛋白
大球蓋菇 β-丁香烯末端糖基化
密蘇里游動放線
腐皮鐮孢 甲芬那黑色
