操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
MLN4924 hydrochloride | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | FS-X10518 |
產(chǎn)品介紹:
英文名稱(chēng):MLN4924 hydrochloride 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg MLN4924hydrochloride是一種選擇性的NEDD8-activating enzyme抑制劑,IC50值為4.7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):1160295-21-5 別名:Pevonedistat hydrochloride 純度:98.46% 分子式:C??H??ClN?O?S 分子量:479.98 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
多變毛霉環(huán)指蛋白9抗體Anti-IGF2R Antibody同型半胱(HA)
芹側(cè)耳金屬蛋白組織抑制因子-1抗體(C端)Anti-IGFBP1 Antibody同線(xiàn)蛋白2(ST2)
大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○128表達(dá)蛋白19A抗體Anti-IGFBP1 Antibody同線(xiàn)蛋白1(ST1)
植物乳桿菌敏感性離子通道蛋白抗體Anti-IGFBP2 Antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡH肽1(GTF2H1)
白僵菌胸腺基質(zhì)淋巴生成-1抗體Anti-IGFBP1 Antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡF肽1(GTF2F1)
擬木荷生德克斯酵母骨架相關(guān)蛋白2抗體Anti-IGF2R Antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡE肽1(GTF2E1)
小小鏈霉菌(微小鏈霉菌)轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體Anti-IGFBP2 Antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡB(GTF2B)
短芽孢桿菌腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白8Anti-IGFBP1 Antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA肽1(GTF2A1)
孢吸水鏈霉菌北京變種轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體Anti-IGFBP2 Antibody停靠蛋白7(DOK7)
竹黃*扭轉(zhuǎn)蛋白B抗體Anti-IGFBP3 Antibody??康鞍?(DOK6)
異常威克漢姆酵母巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白8抗體Anti-IGFBP3 Antibody??康鞍?(DOK5)
金灰青霉味覺(jué)受體蛋白家族2亞基7抗體Anti-IGFBP4 Antibody??康鞍?(DOK4)
大腸埃希氏菌味覺(jué)受體蛋白家族2亞基50抗體Anti-IGFBP3 Antibody(PB0748)??康鞍?(DOK3)
魚(yú)蛉假絲酵母扭轉(zhuǎn)原腸胚形成同源蛋白1抗體Anti-IGFBP5 Antibody停靠蛋白2(DOK2)
解淀粉堿單胞菌Tuftsin蛋白抗體Anti-IGFBP3 Antibody??康鞍?(DOK1)
立枯絲核菌跨膜蛋白161A抗體Anti-IGFBP5 Antibody鐵氧還蛋白還原(FDXR)
神經(jīng)元特異性蛋白3抗體靈芝(紅芝,赤芝)(斜面)小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞
細(xì)胞分化蛋白SEPT12抗體糙皮側(cè)耳、平菇(斜面)小鼠食管平滑肌細(xì)胞
細(xì)胞分化蛋白SEP1抗體巴西曲霉小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞
細(xì)胞分化蛋白SEPT10抗體努比鹵地?zé)o氧芽孢桿菌小鼠心肌成纖維細(xì)胞
NEDD8活化酶抑制劑榆生玉蕈 1-溴-3,5-二甲氧基苯1型膠原蛋白a
毛霉屬 1-(4-溴苯基)萘轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β
羽扇豆根瘤 3-氨基四鹽鹽結(jié)核分枝桿
蘭灰鏈霉 2′7′-二熒光二乙鹽結(jié)核分枝桿γ-干擾
淡紫擬青霉 三(4-基)腺激
芽孢桿屬 1--1H,1H,2H,2H-全氟癸烷腺激
枯草芽孢桿 1H,1H,2H,2H-全氟己-1-趨化因子配體23
淡紫青霉 3-氟-4-(三氟甲基)苯甲3-葡萄糖孕二
志賀氏 Fmoc-Dab(Alloc)-OH雌一
阿拉爾放線(xiàn)多孢 2--6-氟亨廷頓蛋白
大腸埃希氏 5-硫代-D-葡萄糖低密度脂蛋白
華美鏈霉 SU5416空泡病40
巨型艾美耳球蟲(chóng) 2',6'-二苯乙酮缺陷病
微小小單胞 2-溴苯乙烯Klotho蛋白
淡紫褐鏈霉 3-苯乙烯髓過(guò)氧化物