Cdc42抑制劑(ML141)正在熱銷的產(chǎn)品：PKB (mouse) 小鼠蛋白激B氟化銻(III) 99.8% metals basis
TNF－ Alpha 小鼠腫瘤壞死因子-α溴酰溴 97%
TNF－ Beta 小鼠腫瘤壞死因子-β2-溴異丁酯 98%
mouse adiponectin 小鼠脂聯(lián)3-酯 98%
Mouse visfatin 小鼠內(nèi)臟脂肪硅 28%溶液
Mouse E
中文名稱：Cdc42抑制劑(ML141)
英文名稱：ML141
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10682
產(chǎn)品介紹:
ML141是Cdc42高效選擇性抑制劑，IC50值為200nM，對其他Rho GTPase家族成員作用力弱。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：71203-35-5 別名：CID-2950007 純度：99.51% 分子量：407.49 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
麥根腐平臍蠕孢腺單磷活化蛋白激β1抗原Anti-ATP5D Antibody癌調(diào)蛋白(OCM)
淡紫擬青霉基質(zhì)金屬蛋白-1Anti-ATP5F1D Antibody癌胚抗原相關(guān)粘附分子8(CEACAM8)
慶笙紅球菌基質(zhì)金屬蛋白-2(多肽抗原)Anti-ATP5MC2 Antibody癌胚抗原相關(guān)粘附分子7(CEACAM7)
絲狀鏈霉菌基質(zhì)金屬蛋白-3(抗原)Anti-ATP5MC3 Antibody癌胚抗原相關(guān)粘附分子6(CEACAM6)
枯草芽孢桿菌基質(zhì)金屬蛋白-7(抗原)Anti-ATP5MF Antibody癌胚抗原相關(guān)粘附分子1(CEACAM1)
琉球曲霉金屬基質(zhì)蛋白-14Anti-ATP5ME Antibody癌胚抗原(CEA)
松針散斑殼GDNF家族受體α-1（抗原）Anti-ATP5MGL Antibody癌抗原1(CAGE1)
產(chǎn)黃青霉血管緊張II抗原Anti-ATP6V0D1 Antibody癌/抗原62(CTAG62)
ATCC 14025葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2（抗原）Anti-ATP6V1C2 Antibody癌/抗原2(CTAG2)
密黃紅菇心鈉肽（心鈉）抗原Anti-ATP6V1H Antibody阿片肽(OP)
輝光柄菇*GDNF家族受體α-4（抗原）Anti-ATP6V1B1 Antibody阿洛利敏感鈉離子通道蛋白1γ(SCNN1γ)
普通裂褶菌生長激釋放激（因子）（抗原）Anti-ATP5PB Antibody阿洛利敏感鈉離子通道蛋白1β(SCNN1β)
多主殼菌血管位蛋白樣1/血管生成樣蛋白-1抗原Anti-ATP5MPL Antibody阿洛利敏感鈉離子通道蛋白1α(SCNN1α)
鏈孢囊菌葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4（抗原）Anti-ATP6V1H Antibodyτ-微管蛋白激2(tTBK2)
小孢根霉胃泌抑制肽（抗原）Anti-ATPAF2 Antibodyτ-蛋白激1(τPK1)
Rudaea血管位蛋白樣2/血管生成樣蛋白-2（多肽）Anti-ATR Antibodyδ樣蛋白4(δLL4)
蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基5C/PP2A-B56-γ抗體托木爾假單胞菌人前列腺癌細胞
蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基5D/PP2A-B56-δ抗體食芽孢桿菌小鼠纖維肉瘤細胞
細胞膜調(diào)控蛋白Paralemmin1抗體Burkholderiaxenovorans小鼠骨髓來源樹突狀細胞
泌乳受體抗體Phenylobacteriummuchangponense中國倉鼠卵巢細胞亞株
Cdc42抑制劑(ML141)新月彎孢霉* 3-巰基異酯肌鈣蛋白T
豬丹絲 4-吡啶鹽鹽肌間線蛋白
藍色犁頭霉 N-(2-乙基)乙酰布病
Nocardioides salarius 1,2,3,4-四-O-乙?；?β-D-葡萄糖甲酯傳染性胸膜肺炎
纖維單胞屬 (S)-(-)-2-甲酯μ-鈣激活
澳大利亞莢孢腔 2-氨基-5-甲基噻唑口蹄疫A型
樟疫霉 (+/-)-兒茶精細粒棘球絳蟲抗體
聚生殼 4-氨基對三聯(lián)苯三磷磷脂酰肌
凍土毛霉 5-噻吩-2-甲1,4,5-三磷肌
香蕉 3,5-雙(三氟甲基)磷脂酰肌二磷
釀酒酵母 溴乙酰二甲縮α-乳白蛋白
干草寒冷桿 2-甲基喹喔啉β內(nèi)酰
啤酒酵母 2,5-二苯基-1,3,4-惡二唑脂肪合成
栗疫 5-氨基-4-甲酰咪唑 鹽鹽胃蛋白
盤孢 2-甲氧基苯硫抑制A
