c-Met/ALK抑制劑正在熱銷的產(chǎn)品：ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit 人尿微量白蛋白硬脂異辛酯 95%
AAA(Human adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體硬酯酯 99%
RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen
產(chǎn)品介紹:
Crizotinib hydrochloride是一種有效的c-Met/ALK抑制劑，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中IC50分別為11nM，24nM 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1415560-69-8 別名：PF-02341066 hydrochloride 純度：99.86% 分子量：486.8 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱：c-Met/ALK抑制劑
英文名稱：Crizotinib hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
貨號：FS-X10830
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
立枯絲核菌大鼠B淋巴瘤因子2Anti-OXR1 Antibody人β內(nèi)酰(β-lactamase)
污黑腐皮殼大鼠CXC趨化因子受體3Anti-ORC1 Antibody人β內(nèi)酰(β-lactamase)
棘孢小單孢菌小鼠腫瘤壞死因子βAnti-OSR2 Antibody人β甘露糖(β Manase)
Arenibacter sp.人食欲/阿立新BAnti-OVOL1 Antibody人β甘露糖(β Manase)
灰平鏈霉菌小鼠Ⅳ型膠原Anti-P2RY11 Antibody人β半乳糖(βGAL)
孢囊放線菌大鼠中性粒彈性蛋白Anti-P2RY13 Antibody人β半乳糖(βGAL)
立枯絲核菌人促睡眠肽Anti-P2RY4 Antibody人αL艾杜糖(IDUA)
PET-22b人6-羥多巴Anti-P2RY14 Antibody人αL艾杜糖(IDUA)
依利諾斯類芽胞桿菌小鼠己糖激Anti-P2RY8 Antibody人αL艾杜糖(IDUA)
枯草芽孢桿菌大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子Anti-P4HB Antibody人αL艾杜糖(IDUA)
宇佐美曲霉小鼠脫氫E1Anti-p90 RSK1 Antibody人α2抗纖溶(α2-AP)
新型隱球酵母原變種大鼠羥脯Anti-PACRG Antibody人α2抗纖溶(α2-AP)
金黃桿菌屬人心納Anti-PABPC5 Antibody人N-乙酰-β-D-基葡萄糖(NAG)
榛色假單胞菌小鼠糖原合成激Anti-PABPC3 Antibody人N-乙酰-β-D-基葡萄糖(NAG)
地衣芽胞桿菌大鼠骨保護(hù)配體Anti-PACS1 Antibody人L解(PAL)
小孢根霉華變種人神經(jīng)髓鞘蛋白Anti-PAK2 Antibody人L解(PAL)
RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體#牛肝菌屬人小氣道上皮細(xì)胞
Ras樣蛋白A抗體楊褐盤二孢多芽管轉(zhuǎn)化型人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基：（原代細(xì)胞）
Rh血型C抗原抗體松色二孢鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
環(huán)指蛋白11抗體盤多毛孢菌小鼠輔助性T細(xì)胞
c-Met/ALK抑制劑膠孢 肉湯培養(yǎng)基Dβ干擾
塞氏檸檬桿 增肉湯培養(yǎng)基E瘟病抗體
金色毛殼 瓊脂培養(yǎng)基F低密度脂蛋白
青霉 肉湯培養(yǎng)基G胰島
稻生黃單胞 瓊脂培養(yǎng)基H甲型肝炎1型病
大麗花輪枝孢（棉花黃萎病） 乳糖-雙岐桿鑒定漿膜炎抗體
飲料 胭脂紅、檸檬黃、日落黃 松三糖-雙岐桿鑒定禽呼腸孤病抗體
釀酒酵母 棉子糖-雙岐桿鑒定新城疫中強(qiáng)核
佛羅里達(dá)紅曲霉 山梨-雙岐桿鑒定白介4
產(chǎn)氣腸桿 N,N-二乙基-2-甲基-1,4-苯白介
浸麻類芽孢桿 2-氨基-5-吡啶Ⅱ型膠原
Pseudomonas defluvii 雙(4-溴苯基)分泌型球蛋白A
醋醅類芽孢桿 叔戊基苯含黃單氧化3
新月彎孢 3-乙?；溅霉?半胱合成
銹赤蠟黃鏈霉 (s)-(+)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯乙酰肌肽
