豬肺泡巨噬細胞公司正在出售的產品： 英文名稱：FibroFectagen® 成纖維細胞轉染試劑盒 規(guī)格:200 Transfections
英文名稱：EpiFectagen® 上皮細胞轉染試劑盒 規(guī)格:100 Transfections
英文名稱：MesenFectagen® 間充質干細胞轉染試劑盒 規(guī)格:250 Transfections
英文名稱：AstroFectagen®星形細胞轉染
產品屬于：
產品名稱：豬肺泡巨噬細胞
產品英文：3D4/21
貨號：FS-01X9740
細胞培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%丙酮酸鈉+1%NEAA+1%Hepes+1%L-氨酰胺+2.2g/L葡萄糖+1%P/S
生長狀態(tài)：貼壁生長
產品規(guī)格：1×106
單位：T25/瓶
是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度（℃）37
運輸溫度（℃）：常溫
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞 在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。 2.研究條件可以人為控制 pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。 3.研究的樣本可以達到比較均一性 通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。 4.研究內容便于觀察、檢測和記錄 采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
1. 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。 2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。 3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。 4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。 6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。 7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
人嗜粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒英文名稱：Human Eotaxin 1 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
人內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒英文名稱：Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
人睫狀神經營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒英文名稱：Human Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒英文名稱：Human CXC-chemokine receptor 1,CXCR1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒英文名稱：Human XC-chemokine receptor 1,XCR1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒 英文名稱：Human secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒英文名稱：Human E-Cadherin,E-Cad ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
人腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒英文名稱：Human Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人神經調節(jié)蛋白1(NRG-1)ELISA試劑盒英文名稱：human Neuregulin 1,NRG-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人多巴D2受體(D2R)ELISA試劑盒英文名稱：Human dopamine D2 receptor,D2R ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人神經元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human neuronal apoptosis inhibitory protein,NAIP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人食欲/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒英文名稱：Human Orexin B,OX-B ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人促睡眠(DSIP)ELISA試劑盒英文名稱：Human delta sleep-inducing peptide,DSIP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
加壓(AVP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human arginine vasopressin,AVP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人垂體腺環(huán)化激活(PACAP)ELISA試劑盒英文名稱：Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人微管相關蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒英文名稱：Human microtubule-associated protein 2,MAP-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人神經絲蛋白(NF)ELISA試劑盒英文名稱：Human neurofilament protein,NF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人利鉀尿(KP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human kaliuretic peptide,KP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
豬肺泡巨噬細胞kir 6.1/IRK8 ATP敏感鉀離子通道蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
CLCN2/CLC-2 氯離子通道蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
ITPR3 5-三磷肌受體3抗體規(guī)格: 0.2ml
PLC β2/Phospholipase C beta 2 磷酯Cβ2抗體規(guī)格: 0.2ml
MUSK 肌肉骨骼受體酪抗體規(guī)格: 0.1ml
connexin-30 間隙連接蛋白30抗體規(guī)格: 0.1ml
SGK3 /蛋白激Sgk3抗體規(guī)格: 0.2ml
BAZ/ACF1 溴區(qū)結構域相鄰鋅指蛋白1A抗體規(guī)格: 0.2ml
