中文名稱:Nrf2激活劑(Curcumin)
英文名稱:Curcumin
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|500mg
貨號:FS-X10447
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Curcumin 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|500mg Curcumin是一種天然的酚類化合物,具有顯著的抗氧化作用,通過激活Nrf2來起到化療作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:458-37-7 別名:Indian Saffron;Turmeric yellow;Natural Yellow 3;Diferuloylmethane 純度:99.68% 分子量:368.38 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種枯草溶菌轉(zhuǎn)化1抑制劑抗體Anti-CDK6 Antibody瘦受體(Leptin receptor)
類干酪乳桿菌枯草溶菌轉(zhuǎn)化1抑制劑抗體Anti-CDK8 Antibody瘦(LEP/Leptin)
黃綠鏈霉菌蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基5C/PP2A-B56-γ抗體Anti-CDK7 Antibody噬性趨化因子-2(Eotaxin-2)
金龜子綠僵菌蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基5D/PP2A-B56-δ抗體Anti-CDK7 Antibody噬性趨化因子(Eotaxin)
新城疫病磷化絲/蘇抗體Anti-CDKN1C Antibody嗜性粒趨化因子(Eotaxin)
變灰青霉ATP鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMCA3抗體Anti-CDK9 Antibody(PB0565)嗜粒趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)
鍺栓孔菌 PUM1蛋白抗體Anti-CDKN1C Antibody生長因子(GH)
紅曲霉核糖核結(jié)合蛋白1抗體Anti-CDKN1B Antibody生長調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)
細(xì)鏈格孢神經(jīng)叢蛋白B2抗體Anti-CDO1 Antibody神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)
平滑假絲酵母磷化p53結(jié)合蛋白1抗體Anti-CDR2 Antibody前動力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)
谷棒桿菌PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白GOPC抗體Anti-CEACAM5 Antibody凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)
異常漢遜酵母轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體Anti-CDR2 Antibody苗條受體(Leptin receptor)
北里胞菌多型性腺瘤基因樣蛋白1抗體Anti-CEACAM5 Antibody苗條(OB)
副干酪乳桿菌腫瘤抑制基因p53抗體Anti-CEBPA Antibody苗條(LEP)
產(chǎn)短桿菌蛋白激活受體4抗體Anti-CEBPA Antibody粒趨化蛋白2(GCP-2/CXCL6)
硬水黃桿菌原鈣粘蛋白β5抗體Anti-CEBPB Antibody(PB0119)粒巨噬集落激因子(GMCSF/CSF2)
豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌Actinobacillus│Pleuropneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
有毒艾美耳球蟲Eimeria│nocens 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
海桿菌Marinobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Nrf2激活劑(Curcumin)釀酒酵母 4-乙炔基吡啶鹽鹽腺病
缺陷短波單胞 6-乙氧基-2-萘網(wǎng)膜
球毛殼 安息香甲B1
肉色諾卡氏 聯(lián)萘磷酯水通道蛋白8
大奇異球 Boc-L-脯酰水通道蛋白9
枯草芽孢桿 3-甲酰氨苯5-羥色受體1A
雙孢鐮孢 雙(1,5-環(huán)辛二烯)四氟銥(I)抗釀酒酵母抗體
林肯鏈霉 雙(1,5-環(huán)辛二烯)四氟銠1,25-二羥基維生D
毛頭鬼傘 (1R,2R)-(+)-1,2-二苯基-1,2-乙二利什曼病
牛奶 三聚 滅瘟 S 鹽鹽N-甲基-D-天門冬(NMDA)受體A亞單位NR2
新城疫病 2,6-二甲基-4-P物質(zhì)的受體
地下諾爾氏 替普羅肽卵泡抑樣蛋白1
戊糖乳桿 2-溴-5-磺基轉(zhuǎn)移
根瘤 5--2-氟苯磺酰硫甲基轉(zhuǎn)移
人參地土地桿 2-氟-5-苯甲果糖