Wnt信號(hào)激活劑(BML-284)正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：CD34 CD34(多肽抗原)上門(mén)維修費(fèi)用
CD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1) 神經(jīng)粘附分子1(抗原)烯六氟丁酯 96%
CEAcam8/CD67 (carcinoembryonic gen-related cell adhesion molecule 8) 癌胚抗原相關(guān)粘附分子8（抗原）
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱(chēng)：Wnt信號(hào)激活劑(BML-284)
英文名稱(chēng)：BML-284
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號(hào)：FS-X10604
產(chǎn)品介紹:
BML-284是有效的選擇性,及細(xì)胞滲透性的Wnt信號(hào)激活劑。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：853220-52-7 純度：99.92% 分子量：350.37 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
熱帶假絲酵母兔抗馬IgG抗血清Anti-RECK Antibody肌原纖蛋白2(FBN2)
釀酒酵母小鼠抗人IgGAnti-REC8 Antibody肌原纖蛋白1(FBN1)
土星擬威爾酵母subsufficiens變種兔抗馬IgMAnti-REL Antibody肌原調(diào)節(jié)蛋白3(MYOZ3)
聚生殼菌羊抗人IgGAnti-REL Antibody(PB0733)肌原調(diào)節(jié)蛋白2(MYOZ2)
弗尼青霉兔抗人IgGAnti-RELA Antibody肌原調(diào)節(jié)蛋白1(MYOZ1)
貝倫格葡萄座腔菌兔抗AAnti-RELA Antibody肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)
無(wú)二檸檬桿菌兔抗小鼠IgG-FcAnti-RELA Antibody肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白(DMD)
腸膜明串珠菌右旋葡聚糖亞種兔抗豬IgGAnti-RELA Antibody肌纖蛋白(MYOC)
檸檬綠木霉兔抗豬IgG抗血清Anti-RELB Antibody肌微管1(MTM1)
黏液桿菌兔抗大鼠IgG抗血清Anti-RELA Antibody肌微管鈣黏附蛋白(CDH15)
木蹄層孔菌小鼠抗大鼠IgGAnti-RELA Antibody肌特異性烯化(MSE)
仰孔菌兔抗大鼠IgGAnti-RELB Antibody肌糖ζ(SGCζ)
波蘭青霉小鼠抗兔IgGAnti-REN/Renin Antibody肌糖ε(SGCε)
繩生毛殼兔抗小鼠IgGAnti-RETN Antibody肌糖δ(SGCδ)
吉氏庫(kù)特菌兔抗猴IgGAnti-REPRIMO(RPRM) Antibody肌糖γ(SGCγ)
釀酒酵母兔抗大鼠IgMAnti-RET Antibody肌糖β(SGCβ)
神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1抗體糞產(chǎn)堿菌糞亞種小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞提取物
神經(jīng)組織特異性F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體需鈉弧菌小鼠角膜成纖維細(xì)胞提取物
神經(jīng)降壓受體1抗體火雞沙門(mén)氏菌小鼠角膜上皮細(xì)胞提取物
神經(jīng)降壓受體2抗體騰沖萊西氏菌小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物
Wnt信號(hào)激活劑(BML-284)弗氏檸檬桿 4-氨基睪酮
雜色曲霉 4-氨基丁甲酯 鹽鹽促黃體
長(zhǎng)雙歧桿長(zhǎng)亞種 1-芐氧羰基-3-吡咯烷酮催乳
平臍蠕孢 砷化銦布氏桿抗體
杏鮑菇 N-Fmoc-D-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧Bcl-2相關(guān)X蛋白
豇豆慢生根瘤 N-芴甲氧羰基-L-天冬4-環(huán)己基酯B瘤因子2
巴氏微桿 2,2′-雙溴雙苯γ干擾
德沃斯氏 硒化鋁白介12
假單胞屬 活性氧化鋁白介2
擬粉紅鎖擲孢酵母 活性氧化鋁蛋白酪激
硫磺 活性氧化鋁核因子κB
植物乳桿植物亞種 N-Boc-3-甲乙酯環(huán)氧合2
科大百平（平菇類(lèi)） 1,4-萘醌基質(zhì)金屬蛋白2
淡黑假黑盤(pán) 1-萘磺鈉基質(zhì)金屬蛋白9
柴油食烷 洛莫汀可溶性MHC-I鏈相關(guān)基因A
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
