細(xì)胞膜紅色熒光探針(DiI)正在熱銷的產(chǎn)品：CX3CL1 CX3CL1抗體位戊桂 97%
CX3CR1 趨化因子受體1抗體楊梅 98%
CXorf36 脫羧蛋白體36抗體戊酯 ≥99%
CXorf36 脫羧蛋白體36抗體2,3-丁二 98%
Cyclin A 周期A抗體丁丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)
Cyclin B1 周期B1抗體丁丁酯 >99.
中文名稱：細(xì)胞膜紅色熒光探針(DiI)
英文名稱：DiIC18(3)
產(chǎn)品規(guī)格：10mg
貨號：FS-X9773
產(chǎn)品介紹:
本探針是常用的細(xì)胞膜熒光探針之一，呈現(xiàn)橙紅色熒光。DiI是一種親脂性膜染料，進(jìn)入細(xì)胞膜后可以側(cè)向擴(kuò)散逐漸使整個細(xì)胞的細(xì)胞膜被染色。DiI在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱，僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強(qiáng)的熒光。DiI被激發(fā)后可以發(fā)出橙紅色的熒光，DiI和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中，大激發(fā)波長為549nm，大發(fā)射波長為565nm。 分子式：C59H97ClN2O4 分子量：933.88 ：41085-99-8。 DiI可以溶解于無水乙醇、DMSO和DMF，溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時可以適當(dāng)加熱，并用超聲處理以促進(jìn)溶解。 DiI被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑。DiI通常不會影響細(xì)胞的生存力。被DiI標(biāo)記的神經(jīng)細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下可以存活長達(dá)4周，在體內(nèi)可以長達(dá)一年。DiI在經(jīng)過固定的神經(jīng)元細(xì)胞膜上的遷移速率為0.2-0.6mm/day，在活的神經(jīng)元細(xì)胞膜上的的遷移速率為6mm/day。 DiI除了簡單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外，還可以用于檢測細(xì)胞的融合和粘附，檢測發(fā)育或移植過程中細(xì)胞遷移，通過FRAP檢測脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散，檢測細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。 用于細(xì)胞膜熒光標(biāo)記時，DiI的常用濃度為1-25μM，常用的濃度為5-10μM。DiI可以直接染色活的細(xì)胞或組織，染色時間通常為5-20分鐘。對于固定的細(xì)胞或組織，通常宜使用配制在PBS中的4%多聚進(jìn)行固定，使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?dǎo)致熒光背景較高。 注意事項：熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。 儲存條件：4℃避光，有效期一年。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)英文名：ENA78 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體包裝500mg
上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)英文名：CDHE 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體包裝1g
上皮型脂肪結(jié)合蛋白(FABP5)英文名：FABP5 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體包裝5g
殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)英文名：BPI 腫瘤/抗原74抗體包裝1g
色胺羥化2(TPH2)英文名：TPH2 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38抗體包裝25g
色胺羥化1(TPH1)英文名：TPH1 7號染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
三葉因子3(TFF3)英文名：TFF3 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體包裝100g
三葉因子2(TFF2)英文名：TFF2 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體包裝25g
三肽基肽Ⅰ(TPP1)英文名：TPP1 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體包裝5g
三磷腺(ATP)英文名：ATP 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體包裝1g
三磷肌(IP3)英文名：IP3 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體包裝1g
朊病毒蛋白(PRNP)英文名：PRNP 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體包裝5g
軟骨關(guān)聯(lián)蛋白(CRTAP)英文名：CRTAP 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白61抗體包裝100ml
軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)英文名：COMP 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝25ml
乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)英文名：MFGE8 神經(jīng)酰激CERK抗體包裝100g
: AS3.2783資源名稱: 泡盛曲霉 質(zhì)量規(guī)格：純度> 98%,BR，可用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化生長因子β激蛋白22試劑盒紫檀芪;Pterostilbene
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長因子β3試劑盒竹節(jié)參皂IVa;Chikusetsu
普通變形桿菌Proteus│vulgaris 質(zhì)量規(guī)格：純度>98%,BR,可用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒梓酚;Catalponol
細(xì)胞膜紅色熒光探針(DiI)枯草芽孢桿 2,3-二羥基萘-6-磺鈉血管內(nèi)皮生長因子受體1
釀酒酵母 雙芬血管內(nèi)皮生長因子受體2
枯草芽孢桿 2-氨基-4-溴甲酯血管內(nèi)皮粘附分子1
熱帶假絲酵母 一頻哪酮血管內(nèi)皮抑
溜曲霉 2-氨基-3-溴吡啶血管黏附蛋白
棲藻海桿狀 3-基甲酯血管生成1
西蕃蓮莖基腐病 (S)-(-)-Alpha-氨基-Gamma-丁內(nèi)酯鹽血管生成2
芽孢桿 高鎳(II)六水合物, Reagent Grade血管生成受體酪激2
山柑芽孢桿 Fmoc-L-正纈血管生成樣蛋白2
假單胞屬 2-甲基-4-硝基吡啶血管生成樣蛋白3
繩狀籃狀 2-苯甲酰噻吩血管生長
Bacillus (4-)苯血管性血友病因子
金針菇—HP3 六水合磷鎂血紅蛋白
黑孢霉 鎳六水合物血紅蛋白C
大腸埃希 化釹六水合物血紅蛋白F
