EGFR激酶抑制劑正在熱銷的產(chǎn)品：A/H1N1-M2 Human /Biotin 生物標(biāo)記兔抗人A型人流感病H1N1-M2抗體IgGFmoc-L-異亮氨 99%
OVA/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記兔抗雞卵白蛋白抗體IgGFmoc-L-色氨 98%
FAS(Apo-a1/CD95)/Biotin 生物標(biāo)記兔抗人、大鼠、小鼠載脂蛋白A1抗體IgGFmoc-L-苯氨 98%
Tn-C/FITC 熒
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱：EGFR激酶抑制劑
英文名稱：Erlotinib Hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|500mg
貨號(hào)：FS-X10384
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：Erlotinib Hydrochloride 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|500mg Erlotinib hydrochloride抑制純化的EGFR激酶，IC50為2nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：183319-69-9 別名：CP-358774;OSI-774;NSC 718781 純度：99.91% 分子量：429.9 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
鉆特省芽孢桿菌類固受體激活蛋白3抗體Human FAS(Tumor necrosisfactor receptor superfamily member 6) (GSH)
EC600*軸突導(dǎo)向因子1抗體Human FASL(Factor Related Apoptosis Ligand) 谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)
塔賓曲霉酪激B抗體Human FETUA(Fetuin A) 谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)
巴氏醋桿菌跨膜受體蛋白Notch-3抗體Human FGF19(Fibroblast growth factor 19)谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)
巴氏生孢八疊球菌中性粒彈性蛋白ELANE抗體Human FGF7(Fibroblast growth factor 7) 谷脫羧65(GAD65)
根瘤菌型肝炎病NS4B（65kDa）抗體Human FGF21(Fibroblast growth factor 21) 谷脫羧(GAD)
嗜冷桿菌神經(jīng)生長因子受體相關(guān)蛋白1抗體Human FGF9(Fibroblast growth factor 9) 谷脫氫(GDH/GLDH)
紫晶臘蘑死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體Human FGF4(Fibroblast growth factor 4) 谷受體(NMDAR)
淡紫擬青霉神經(jīng)絲蛋白抗體Human FN1(Fibronectin) 谷-半胱連接調(diào)節(jié)亞基(GCLM)
微管螺旋鏈霉菌磷化核因子抗體Human FCN1(Ficolin-1) 谷[NMDA]受體亞基ε-2(NR-2)
仰光鏈霉菌跨膜受體蛋白Notch-1抗體Human CHI3L1(Chitinase-3-like protein 1) 孤腓肽(OFQ/N)
鐮刀菌屬磷化核受體Rev-Erbα抗體Human DCN(Decorin) 鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)
鴨疫里氏桿菌雞新城疫病抗體Human CST3(Cystatin C) 鉤端螺旋體IgG(Leptospira)
還原型輔Ⅱ/磷酰腺二核抗體Human SLAM/CD150(Signaling Lymphocytic Activation Molecule) 鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)
塔里木類芽孢桿菌NIT2蛋白抗體Human c-MET(Hepatocyte growth factor receptor) 睪受體(TR)
鱈鹽球菌神經(jīng)分化因子1抗體Human C5a(Complement Component 5a) 睪(Testoterone)
犁頭霉Absidia│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR大豆
腸炎沙門氏菌Salmonella│enteritidis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的Met抑制劑黃豆黃
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR，可用于培養(yǎng)黃豆黃
EGFR激酶抑制劑桔林油脂酵母 雙聯(lián)(2-甲基-2,4-戊二)酯脂聯(lián)受體1
淡紫擬青霉(現(xiàn)1) 2-(溴甲基)苯脂聯(lián)受體2
副豬嗜血桿 丁基三化錫脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2
小麥粉 水分、灰分 2,3-二氫-5-基-1-苯并呋喃直接膽紅
豇豆慢生根瘤 (1R,2R)-二[(2-甲氧基苯基)苯基磷]乙烷中介
香菇 無水醋鋅中性粒彈性蛋白
大腸埃希氏 4-溴甲基-3-甲中性粒彈性蛋白2
玫瑰擬層孔 2,5-二甲基-2,5-二羥基-1,4-二噻烷中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白
黃赭色鏈霉 (R)-(-)-N,N-二甲基-1-(2-聯(lián)苯膦基）二茂鐵乙中性內(nèi)肽;腦啡肽
球孢白僵 1-(2--3-吡啶基)-乙酮腫瘤標(biāo)志物；糖類抗原724
淡紫紫霉 N-Α-叔丁氧羰基-D-蘇腫瘤壞死因子α
葛氏沙雷氏 縮水甘油腫瘤壞死因子β
產(chǎn)黃青霉 (S)-N,N-二甲基-1-[(R)-1',2-雙(二苯基膦基)二茂鐵基]乙腫瘤壞死因子γ
鴿痘病 (S)-(+)-N,N-二甲基-1-(2-聯(lián)苯膦基）二茂鐵乙腫瘤壞死因子受體1
霍氏分支桿 3-硝基肉桂腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
