酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)正在熱銷的產(chǎn)品：SREBP-1 膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體二癸 97%
SREBP-2 膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體二正己 99%
srGAP3 精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體癸 98%
synaptotagmin-2 突觸結(jié)合蛋白相關(guān)因2抗體N,N-二丁 98%
Synaptotagmin-4 突觸結(jié)合蛋白4抗體二正辛 97%
SPATA12 特異
產(chǎn)品介紹:
用途： 又稱非特異性酯酶染色液，可用于血液、骨髓或細(xì)胞涂片、冰凍切片的非特異性酯酶染色，亦可作抑制試驗(yàn) 注意事項(xiàng)： 其原理是酸性條件下細(xì)胞中的酸性酯酶將α-乙酸萘酚水解產(chǎn)生α-萘酚，α-萘酚再與六偶氮副品紅偶聯(lián)，生成不溶性紅色沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)。 儲(chǔ)存條件：4℃，避光，6個(gè)月 |
中文名稱：酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：3×10ml|3×20ml
貨號(hào)：FS-X10017
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
平菇胰輔脂抗體Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) 人羥甲基戊二單酰還原(HMG-CoAR)免疫試劑盒
螺卷毛殼19號(hào)染色體開放閱讀框45抗體Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) 人羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)免疫試劑盒
鮮綠青霉過氧化氫誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) 人羥基賴正己(HLNL)免疫試劑盒
釀酒酵母核因子NFκB激活蛋白1抗體Human Hepc(Hepcidin) 人羥脯(Hyp)免疫試劑盒
曲霉第12號(hào)染色體開放閱讀框23抗體Human GSK3α(Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) 人強(qiáng)啡肽(Dyn)免疫試劑盒
釀酒酵母γ-連環(huán)/連接蛋白γ抗體Human GSP(Glycosylated Serum Protein) 人潛伏轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2(LTBP2)免疫試劑盒
日勾維腸桿菌10號(hào)染色體開放閱讀框4抗體Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) 人潛伏膜蛋白1(LMP-1)免疫試劑盒
中國克魯維酵母10號(hào)染色體開放閱讀框47抗體Human GPI(Glucose 6 Phosphate Isomerase) 人前心鈉肽(Pro-ANP)免疫試劑盒
黃色短桿菌10號(hào)染色體開放閱讀框81抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) 人前纖維蛋白1抗體免疫試劑盒
猴頭菌19號(hào)染色體開放閱讀框47抗體Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) 人前纖維蛋白1免疫試劑盒
金黃殼囊孢19號(hào)染色體開放閱讀框54抗體Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) 人前鐵調(diào)(Pro-Hepc)免疫試劑盒
貝雷絲孢酵母N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體Human GR(Glutathione Reductase) 人前列腺性磷(PAP)免疫試劑盒
球孢白僵菌19號(hào)染色體開放閱讀框18抗體Human GIF(Gastric Intrinsic Factor) 人前列腺H2(PGH2)免疫試劑盒
總狀毛霉19號(hào)染色體開放閱讀框21抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) 人前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒
沼澤紅假單胞菌19號(hào)染色體開放閱讀框24抗體Human GLDL(Glycated Low Density Lipoprotein) 人前列腺F(PGF)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) 人前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
葡萄穗霉屬Stachybotrys│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRB連接蛋白試劑盒橙花
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRB活化因子受體試劑盒長梗秦艽
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRB活化因子試劑盒常山乙
酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)巴氏醋桿巴氏亞種 苯磺副流感病1,2,3型IgM抗體
釀酒酵母 十六烷基-β-D-麥芽糖寨卡病IgM抗體
硫色小針層孔 乳環(huán)沙星環(huán)氧二十碳三烯
枯草芽孢桿 乙酰乙酰-2,4-二二羥二十碳三烯
草青霉 硫-5-羥色肌酐磷肌磷脂
香菇 尿促卵泡環(huán)氧化合物水解2
葡萄座腔 2--5-磺酰肝結(jié)節(jié)有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽8
嗜熱液化芽孢桿 5--2-氟苯甲ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白C3
金耳 碳乙烯酯NADPH氧化2
棒曲霉 Fmoc-3-(1-萘基)-L-Eya1蛋白
蓋囊菇 L-β-高亮鹽鹽皰疹病-8型感染
黑曲霉 (R)-8-(二苯基膦)-1,2,3,4-四氫萘-1-多瘤病
葡萄座腔 2-甲氧基-3-吡啶-4-酰基合成3
龜裂鏈霉 鹽雷諾?；铣?
枯草芽胞桿 Maleimide-PEG2-succinimidyl ester二單加氧3
