Akt廣譜抑制劑(GDC-0068)正在熱銷的產(chǎn)品：VEGFR-3(Vascular Epidemal growth factor receptor-3) 血管內(nèi)皮生長因子受體-3抗原4-兒茶 96%
VWF (Von Willebrand Factor) 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原S-異硫脲硫鹽 98%
Wnt1 信號通路Wnt1抗原5-氧-2-巰苯并咪唑 98%
WWOX
產(chǎn)品介紹:
GDC-0068是一種選擇性的Akt廣譜抑制劑，作用于Akt1/Akt2/Akt3，IC50分別為5/18/8nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1001264-89-6 別名：Ipatasertib;RG7440 純度：98.0% 分子量：458.0 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱：Akt廣譜抑制劑(GDC-0068)
英文名稱：GDC-0068
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10600
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
焦曲霉磺酰脲類藥物受體1抗體Anti-PTPRF Antibody棘皮動物微管關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(EML2)
潘泰萊里亞島鹽單胞菌突觸泡蛋白2A抗體Anti-PTPRC Antibody(PB0115)激肽原1(KNG1)
膠孢突觸融合蛋白1抗體Anti-PXN Antibody激肽釋放原(PK)
寡養(yǎng)單胞菌磷化核突觸蛋白α抗體Anti-PYY Antibody激肽釋放結(jié)合蛋白(KAL)
其他質(zhì)粒磷化核突觸蛋白α抗體Anti-PYY Antibody激肽釋放9(KLK9)
橄欖產(chǎn)色鏈霉菌離子轉(zhuǎn)運相關(guān)蛋白SLC7A9抗體Anti-PYROXD1 Antibody激肽釋放8(KLK8)
蠟樣芽孢桿菌乙酰轉(zhuǎn)運蛋白1抗體Anti-PTTG1 Antibody激肽釋放7(KLK7)
梭狀芽孢桿菌滑膜肉瘤X斷點蛋白5抗體Anti-PVRL1/NECTIN1 Antibody激肽釋放6(KLK6)
釀酒酵母腫瘤/抗原11.3抗體Anti-RAB10 Antibody激肽釋放5(KLK5)
茶樹菇外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白1抗體Anti-RAB11A Antibody激肽釋放4(KLK4)
青春雙歧桿菌唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集11抗體Anti-RAB11B Antibody激肽釋放3(KLK3)
布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗抗原Sema6A抗體Anti-RAB13 Antibody激肽釋放2(KLK2)
香菇S100A9抗體Anti-RAB14 Antibody激肽釋放15(KLK15)
哈茨木霉單羧轉(zhuǎn)運蛋4抗體Anti-RAB18 Antibody激肽釋放14(KLK14)
假單胞菌*神經(jīng)降壓受體3抗體（糖蛋白95）Anti-RAB27A Antibody激肽釋放13(KLK13)
黑曲霉轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體Anti-RAB27A Antibody激肽釋放12(KLK12)
蛋白激C結(jié)合蛋白NELL1抗體巨孢鏈霉菌小鼠子宮成纖維細胞提取物
蛋白激C結(jié)合蛋白NELL2抗體利迪鏈霉菌小鼠卵巢上皮細胞提取物
腦特異性跨膜蛋白抗體鏈霉菌小鼠子宮平滑肌細胞提取物
環(huán)一螺旋蛋白1抗體TG1 Strain小鼠子宮頸上皮細胞提取物
Akt廣譜抑制劑(GDC-0068)枯草芽胞桿 1，4-二（基硅烷基）苯球蛋白A
人造沸石球蛋白G
乳桿屬 N,N-二甲基-N-(3-磺基)-1-十八烷內(nèi)鹽球蛋白M
淺綠黃假單胞 氧化鈦(IV)藍舌病
疣梗青霉 氧化鈦(IV)南非口蹄疫病1型
釀酒酵母 2-(三氟甲基)吡啶-3-甲南非口蹄疫病2型
鏈霉屬 線狀氧化銅南非口蹄疫病3型
馬腺疫鏈球獸疫亞種 硫化亞鐵表皮生長因子
矩圓黑盤孢 四氧化三錳神經(jīng)生長因子
釀酒酵母 鄰苯二甲單丁酯前列腺E2
海洋桿 叔丁基二茂鐵前列腺E1
蔥色串孢 (R)-(-)-4-芐基-3-酰-2-惡唑烷酮前列腺F2
釀酒酵母 Chloro[(R)-(+)-2,2'-bis(di-p-tolylphosphino)-1,1'-前列腺F1
單核增生科斯特氏 2-羥基吡啶-N-氧化物前列腺
柱狀田頭菇（茶樹菇、楊樹菇） 碲化鋅半乳糖凝集
