PI3Kα抑制劑(BYL-719)正在熱銷的產(chǎn)品：p-Nrf2/FITC 熒光標記化核因子2相關因子2抗體IgG二二丁 CP
Nrn1/Cpg15/FITC 熒光標記轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體IgG二丁 光譜純
CD303/BDCA-2/CLEC4C 熒光標記C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員C抗體IgG二丁 for HPLC-GC, ≥99.5% (GC)
CD304/BDCA-4/NRP-1 /FITC
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：BYL-719 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg BYL-719是一種有效的選擇性PI3Kα抑制劑，IC50為5nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1217486-61-7 別名：Alpelisib 純度：99.04% 分子量：441.47 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱：PI3Kα抑制劑(BYL-719)
英文名稱：BYL-719
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
貨號：FS-X10298
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中國漢納酵母鋅指蛋白103抗體Human POLM 血管緊張1-7(Ang1-7)
沙福芽孢桿菌纖維母生長因子7抗體Human POLR1C 血管緊張(ANG)
大豆慢生根瘤菌肺Kruppel樣因子抗體Human POLR1A 血管活性肽抑制劑(VPI)
希瓦氏菌*激肽釋放5抗體Human POLR2J 血管活性腸肽(VIP)
白乳菇激肽釋放13抗體Human POLE3 血管動蛋白(AMOT)
Termitomyces bulborhizus 激肽釋放15抗體Human POLG2 旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)
白假絲酵母激肽釋放2抗體Human POLI 溴脫氧核(BrdU)
根霉激肽釋放12抗體Human POLM 雄烯二(ASD)
雞、滑液支原體（-）陰性血清G蛋白偶聯(lián)受體54抗體Human POLR1A 雄激受體(AR)
耐冷冷桿菌驅(qū)動蛋白家族KIF17抗體Human POLR1C 雄激結(jié)合蛋白(ABP)
臭曲霉轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體Human POLR1D 胸腺依賴性抗原(TD-Ag)
皮狀絲孢酵母上皮特異性蛋白1抗體Human POLR1E (TP-5)
西藏木霉磷化離子通道蛋白Kv3.1抗體Human POLG2 β4(Thymosin β4)
科羅拉多擬無枝菌周期基因1蛋白抗體Human POLI α1(Thymosin α1)
粒狀青霉驅(qū)動蛋白KIF5B抗體Human PNRC1 (Thymosin)
木耳kelch樣蛋白13抗體Human LTC4S(Leukotriene C4 synthase) 胸腺嘧啶核磷化(TP)
不解糖假蒼白桿菌Pseudochrobactrum│asaccharolyticum 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
哲拉什黃桿菌Flavobacterium│degerlachei 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)化兩面針堿
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)血根堿
PI3Kα抑制劑(BYL-719)糞腸球* 2-氨基苯乙集落激因子1
日本色鹽桿 4-甲甲酯高密度脂蛋白2
解鳥克雷伯 6--咪唑并[1,2-b]吡-3-甲高密度脂蛋白3
綠色鏈霉 3-氨基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶Trim22分子
多粘類芽孢桿 5-溴煙甲酯NADPH氧化4
枯草芽孢桿 2-氮己環(huán)酮G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1
叢毛紅曲 3,5-二甲基吡唑溶血磷脂酰?；D(zhuǎn)移1
腐質(zhì)霉 4-氟-3-三氟甲基芐?；趸?/span>
傘枝犁頭霉 3-(3-嗎啉氧基)-4-甲氧基芐NADPH氧化4
迪吉氏黃桿 3-噻吩-2-甲還原型輔Ⅰ
木賊鐮刀 ZONYL(R) FSP煙酰腺二核
Sphingobium fuliginis 5-氟-2-甲氧基苯磺酰外基質(zhì)蛋白1
土曲霉 2,4,6-三羥苯乙酮偽狂犬病
鶴羽田戴爾福特 4-甲氧基水楊酰脈絡叢腦膜炎病
無色殼囊孢 5-溴-2--3-硝基吡啶一氧化氮合成1
