DNA甲基化抑制劑正在熱銷的產品：NR1/NMDAR1/GLUR1/FITC 熒光標記谷氨受體1抗體IgG異辛烷 農殘級，>99.5% (GC)
NR1/NMDAR1/FITC 熒光標記谷氨受體1抗體IgG正戊烷 農殘級
Phospho-NMDAR1 (Ser890)/FITC 熒光標記化谷氨受體1抗體IgG紅鋁溶液 70 wt%苯溶液
Phospho-NMDAR1 (Ser896) /FI
中文名稱：DNA甲基化抑制劑
英文名稱：5-Azacytidine
產品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg
貨號：FS-X10296
產品介紹:
英文名稱：5-Azacytidine 產品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg 5-Azacytidine是一種胞苷類似物，通過限制DNA甲基轉移酶來抑制DNA甲基化。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：320-67-2 別名：Ladakamycin;5-AzaC;Azacitidine 純度：98.24% 分子量：244.2 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
橢圓釀酒酵母抗體Human PPIL6 血管內皮粘附分子1(VCAM-1)
空泡鹽紅菌激肽釋放7抗體Human PPAT 血管內皮生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)
黑曲霉激肽釋放9抗體（舒血管9）Human PPM1A 血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)
大腸埃希菌激肽釋放14抗體Human PPCS 血管內皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)
側孢短芽胞桿菌電壓閥門通道混合器相關亞家族成員7抗體Human PPEF1 血管內皮生長因子受體1(VEGFR1)
淡紫擬青霉ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體Human PPM1B 血管內皮生長因子E(VEGF-E)
小平菇（秀珍菇）TIP60抗體Human PPM1F 血管內皮生長因子D(VEGF-D)
根瘤菌組蛋白賴特異性脫甲基1抗體Human PPP1CB 血管內皮生長因子C(VEGF-C)
豌豆根瘤菌轉錄因子GATA3結合蛋白G3B抗體Human PPM1G 血管內皮生長因子B(VEGF-B)
大腸桿菌磷化周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體Human PPID 血管內皮生長因子A(VEGF-A)
吸水鏈霉菌磷化通道蛋白DRK1抗體Human POU3F3 血管內皮生長因子(VEGF165)
熱帶假絲酵母離子通道蛋白Kv3.4抗體Human POLR3A 血管內皮生長因子(VEGF)
頂孢頭孢霉離子通道蛋白Kv3.3抗體Human POLR3D 血管內皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)
鐘器腐霉組蛋白去甲基化JMJD2B抗體Human POLR3B 血管內皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)
嗜熱脂環(huán)芽胞桿菌肝果糖激抗體Human POU3F4 血管內皮生長因子121(VEGF121)
鬼傘脊柱側后凸畸形肽抗體Human POU4F2 血管內皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)
植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質量規(guī)格：>99.0%(GC)續(xù)隨二萜
ATCC700850=DSM11927資源名稱: 方形鹽盒菌 質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規(guī)格：>99.0%(GC)(T)石榴皮鞣
DNA甲基化抑制劑密叢毛霉 α,α-二乙酯脂肪甘油三酯脂
膠孢 1-芐基海因胱天蛋白1
籬邊粘褶 七氟異基活化受體樣激1
叢毛紅曲 4-乙氧基苯乙肝
墻支頂孢 2,5-二煙甲酯脫2
酵母 吲唑-4-羧脂肪酰水解1
食屬 7-羧基-1H-吲唑單?；视王?/span>
假委內瑞拉鏈霉 基氧膦N-乙酰天門冬
釀酒酵母 1-芐基-4-甲角蛋白18
薄層桿 3-基-4-氟甲酯氫ATP
弗吉尼亞鏈霉 2,3,5-三氟苯甲煙酰
Microbacterium halotolerans 6--咪唑并[1,2-b]吡-3-甲乙酯趨化
芽孢桿屬 1-甲基-5-硝基-1H-甲殼質蛋白40
白僵 4-丁縮二甲半胱蛋白11
奇異球 環(huán)丁半胱蛋白1β
