中文名稱(chēng):非甾體芳香酶抑制劑(Letrozole)
英文名稱(chēng):Letrozole
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|200mg|500mg
貨號(hào):FS-X10596
產(chǎn)品介紹:
Letrozole(CGS-20267)是非甾體芳香酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):112809-51-5 別名:CGS 20267 純度:99.91% 分子量:285.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
嗜松青霉核轉(zhuǎn)錄因子SOX8抗體Anti-PROK1 Antibody堿性神經(jīng)酰3(ACER3)
腐皮鐮孢STAC1蛋白抗體Anti-PROK1 Antibody堿性神經(jīng)酰2(ACER2)
韓國(guó)海桿狀菌亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體Anti-PROM1 Antibody堿性神經(jīng)酰1(ACER1)
山原申氏菌雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen2抗體Anti-PROM1 Antibody堿性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)
泡囊短波單胞菌溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體Anti-PROM1 Antibody堿性成纖維生長(zhǎng)因子(FGF2)
黃色孢鏈霉菌SNX27蛋白抗體Anti-PROM1 Antibody(PB0168)堿核蛋白2(BNC2)
孟氏假單胞菌電壓開(kāi)啟的鈉離子通道SCN9A抗體Anti-PROX1 Antibody堿核蛋白1(BNC1)
Cecembia sp.5-羥色受體4抗體Anti-PROS1 Antibody剪切修復(fù)交叉互補(bǔ)修復(fù)缺陷偶聯(lián)因子1(ERCC1)
大腸埃希氏菌5-羥色受體3抗體Anti-Prosurfactant Protein C/SFTPC Antibody剪切多聚腺化特異性因子1(CPSF1)
球孢白僵菌抑癌基因SNF2β抗體Anti-PRX Antibody剪接因子4(SF4)
環(huán)圈鏈霉菌血清應(yīng)答因子抗體Anti-PRX Antibody剪接因子1(SF1)
球孢白僵菌膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體Anti-PRX Antibody減數(shù)分裂重組蛋白5(MEI5)
斑形葉點(diǎn)霉泛樣修飾體-1抗體Anti-PSAT1 Antibody(PB1142)減數(shù)分裂抑制因子1(MEI1)
釀酒酵母信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Anti-PSCA Antibody監(jiān)理蛋白(SVIL)
蠟狀芽孢桿菌卵巢癌相關(guān)蛋白抗體Anti-PSCA Antibody間隙連接蛋白β1(GJβ1)
球孢白僵菌相關(guān)抗原5抗體Anti-PSD Antibody間隙連接蛋白43(CX43)
核受體蛋白NR2E3抗體潰瘍棒狀桿菌小鼠心肌成纖維細(xì)胞提取物
γ-分泌組件蛋白NCLN抗體接棒桿菌小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物胞
神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DPF1抗體溶血隱秘桿菌小鼠食管平滑肌細(xì)胞提取物
N-乙酰轉(zhuǎn)移8抗體鉛黃腸球菌小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞提取物
非甾體芳香酶抑制劑(Letrozole)異常漢遜酵母 代三吡咯烷基鏻六氟磷鹽蛋合成
枯草芽孢桿 8-溴-2'-脫氧鳥(niǎo)3-羥酰脫氫
球形芽胞桿 5-氨基-2-并噻唑ATP
多主葡萄殼 丁基三苯基化膦膜結(jié)合型前列腺E合成1
土曲霉 2-氨基-4-吡啶羧前列腺E合成1
伊氏利斯特氏 N,N-二基磺酰精氨基琥珀合成
白色球形孢囊 Boc-O-芐基-L-蘇氨精氨琥珀裂解
克魯弗酵母 堿式乙鉛半胱氨酰氨肽
東方伊薩酵母 堿式乙鉛鈣調(diào)磷
碳樣小單孢 Boc-Glutaminol天蠶B
季也蒙邁耶氏酵母 堿式乙鉛谷氨酰
矩圓黑盤(pán)孢 Fmoc-Glu(OAll)-OH晶體蛋白α
沙氏倚囊霉 2-(三氟甲基)苯硫晶體蛋白β
可可豆醋桿 3-糖原
短小芽孢桿 鋅透明質(zhì)