小分子抑制劑(Sitravatinib)正在熱銷的產(chǎn)品：sE-selectin ELISA Kit 大鼠可溶性E選擇環(huán)己 Standard for GC,>99.0% (GC)
IL-1sR II ELISA Kit 大鼠白介1可溶性受體Ⅱ環(huán)己 CP,97%
17-OHCS ELISA Kit 大鼠17羥皮質(zhì)類固環(huán)己 AR,98%
NAG ELISA Kit 大鼠N-酰-β-D-氨葡萄糖己
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱：小分子抑制劑(Sitravatinib)
英文名稱：Sitravatinib
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號(hào)：FS-X10959
產(chǎn)品介紹:
Sitravatinib是一個(gè)新穎的小分子抑制劑，靶點(diǎn)是多個(gè)RTKs，IC50值是3980nmol/L。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：1123837-84-2 別名：MGCD516;MG516 純度：98.64% 分子量：629.68 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
巨大芽孢桿菌人2,3Dinor血栓烷B2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠白三烯C4(LTC4)
球孢白僵菌人11去氫血栓烷B2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠色C(Cyt-C)
小煤炱菌屬人血栓調(diào)節(jié)蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠色C(Cyt-C)
核果叢梗孢人纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠游離甲狀腺(FT4)
雙環(huán)林地蘑菇人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢaBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠游離甲狀腺(FT4)
海洋拉布倫茨氏菌人血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)
雅致放射毛霉人血漿α顆粒膜蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)
松口蘑人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠黑色抗體(MC Ab)
水棲黃桿菌人補(bǔ)體蛋白4Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠黑色抗體(MC Ab)
解污泥黃桿菌人補(bǔ)體蛋白3Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠甲狀腺(T4)
地衣芽孢桿菌人ⅡBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠甲狀腺(T4)
長(zhǎng)枝木霉人類白抗原B27Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)
土曲霉人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)
假單胞菌人血清總補(bǔ)體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠過(guò)敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)
加利福尼亞犁頭霉人過(guò)敏/補(bǔ)體片斷4Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠過(guò)敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)
甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌人補(bǔ)體片斷5aBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠狀腺原(T3)
鋅指蛋白ZIC5抗體假單胞菌屬歐洲鰻鱺肝臟細(xì)胞
鋅指蛋白312抗體黃桿菌屬小鼠脾臟成纖維樣細(xì)胞
鋅指蛋白57抗體吡咯伯克霍爾德氏菌幼兔肺成纖維樣細(xì)胞
鋅指蛋白300抗體假真菌樣芽孢桿菌人皮膚毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞
小分子抑制劑(Sitravatinib)曲霉疏展變種 肉桂四環(huán)
短乳桿 植凋亡激活因子
阪崎腸桿 酵母浸出粉Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白
毀滅柱孢 漆黃Bcl-2相關(guān)X蛋白
大腸埃希 秦皮甲腫瘤壞死因子受體1
槐殼囊孢 花旗松谷鹽
猴頭 鬼臼心肌肌球蛋白重鏈
褐絲膜 四丁基高D-乳
蠟狀芽孢桿 4,4'-聯(lián)苯二脂多糖；內(nèi)
巨大栓孔 三號(hào)膽鹽一磷腺
康寧木霉 對(duì)羥基二磷腺
冷湖黃桿 梧桐膠氨酰tRNA合成
煙曲霉 2,2'-二硫二吡啶組氨酰tRNA合成
黑曲霉 4-(N-馬來(lái)酰亞基)環(huán)己烷-1-羧琥珀酰亞酯組氨酰tRNA合成
茄鏈格孢 表兒茶粒巨噬集落激因子
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
