操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
PHA-665752 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | FS-X10549 |
產(chǎn)品介紹:
PHA-665752是ATP競(jìng)爭(zhēng)性c-Met選擇性抑制劑,IC50為9nM,比對(duì)RTKs和STKs的抑制性高50倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):477575-56-7 純度:96.50% 分子量:641.61 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
大腸埃希氏菌血管擴(kuò)張激磷蛋白抗體Anti-MBD2 Antibody溶血磷脂Ⅰ(LYPLA1)
球孢白僵菌磷化血管擴(kuò)張激磷蛋白抗體Anti-MBD4 Antibody溶神經(jīng)(NLN)
枯草芽孢桿菌磷化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體Anti-MBD2 Antibody溶體性磷2(ACP2)
松鼠葡萄球菌松鼠亞種磷化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體Anti-MBD4 Antibody溶體關(guān)聯(lián)膜蛋白2(LAMP2)
藤倉(cāng)赤霉磷化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體Anti-MBL2 Antibody溶體關(guān)聯(lián)膜蛋白1(LAMP1)
豬丹絲菌血管內(nèi)皮粘附分子抗體Anti-MBP Antibody絨毛膜促性腺激α肽(CGα)
梨形游動(dòng)放線菌纈抗體Anti-MBNL1 Antibody絨毛膜促性腺激(CG)
單色云芝血管粘附蛋白1抗體Anti-MBL2 Antibody絨毛蛋白1(VIL1)
釀酒酵母間粘附蛋白Vinexin抗體Anti-MC1R Antibody相關(guān)血漿蛋白A2(PAPPA2)
彩色豆馬勃波形蛋白抗體Anti-MC3R Antibody特異性β1-糖蛋白(PSG1)
人參土獨(dú)島桿菌維生A抗體Anti-MC2R Antibody關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)
栗疫菌蛋白聚糖Versican抗體Anti-MCAM Antibody帶蛋白(PZP)
芽孢桿菌屬VWCE抗體Anti-MC4R Antibody17-β-羥基類固脫氫14(HSD17β14)
紅曲紅曲視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX1抗體Anti-MCAM Antibody熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)
枯草芽孢桿菌枯草亞種視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX2抗體Anti-MCL1 Antibody熱休克轉(zhuǎn)錄因子2(HSF2)
休哈塔假絲酵母維生D3受體抗體Anti-MCM2 Antibody熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)
第10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框27抗體樹(shù)干畢赤酵母大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞
SH2B蛋白抗體裂褶菌(斜面)大鼠腦膜成纖維細(xì)胞
環(huán)指蛋白142抗體非脫羧勒克菌大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞
SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體燕麥?zhǔn)尘帑渷喎N大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
c-Met抑制劑(PHA-665752)紅細(xì) Boc-O-芐基-D-蘇氨抗性磷
芥鏈格孢 N-Cbz-對(duì)氨基環(huán)己酮Ⅰ型膠原C末端肽
Bacillus anthracis N,O-1,3-二乙?;裥湍z原N末端肽
小弧 10-羥基癸多殺性巴氏桿
皺紋單胞 3-己炔-2-酮非變性二型膠原蛋白
側(cè)耳 叔丁氧羰基-L-天冬-4-叔丁酯胃饑餓
疣孢漆斑 L-谷-γ-芐酯膽囊收縮;縮膽囊八肽
玉大斑病 4'-乙氧基苯乙酮H9抗體
三色革裥 4-氨基-2-溴腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3
冷桿屬 Zinc hexafluoroacetylacetonate hydrate,Zn(CF3COCHC網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病抗原
蘇云金芽孢桿庫(kù)爾斯塔克亞種 Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病抗體
相思根瘤 5-溴-2-甲乙酯血清白蛋白
沙雷氏 Cleviprex大腸桿病
波多野氏微桿 6-羥基-2-萘甲沙門(mén)氏
腓特烈斯堡分枝桿 順-4-羥基環(huán)己特丁酯新城疫病