PAK抑制劑(PF-3758309)正在熱銷的產(chǎn)品：MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相關糖蛋白a/b(抗原)過氧化氫異苯 80-85 %
MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關糖蛋白(抗原)過氧化環(huán)己酮 50%鄰苯二二辛酯溶液
MAG-a (
中文名稱：PAK抑制劑(PF-3758309)
英文名稱：PF-3758309
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10616
產(chǎn)品介紹:
PF-3758309是一種有效的PAK抑制劑，能夠抑制PAK4的活性，IC50值為1.3nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：898044-15-0 純度：98.41% 分子量：490.62 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
茶葉 鈧、釔、鑭 PE標記的小鼠抗人IgGAnti-SHP-1(PTPN6) Antibody核糖核A6(RNASE6)
黑綠木霉Alexa Fluor 647標記的兔抗人IgGAnti-SHP-1(PTPN6) Antibody核糖核A4(RNASE4)
煙曲霉生物標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-SHP1/PTPN6 Antibody核糖核A3(RNASE3)
耐輻射奇球菌突變株PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-SI Antibody核糖核A2(RNASE2)
多粘類芽胞桿菌PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-SIDT1 Antibody核糖核A13(RNASE13)
群生殼菌PE-Cy3標記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-SIRT1 Antibody核糖核A12(RNASE12)
硝基還原假單胞菌PE-CY5標記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-SIRT1 Antibody核糖核A11(RNASE11)
弗氏鏈霉菌生物標記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIRT2 Antibody(PB0174)核糖核A10(RNASE10)
香菇Alexa Fluor 647標記的兔抗猴IgMAnti-SIRT4 Antibody核糖核A(RNASE1)
根霉PE標記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIRT6 Antibody(PB0375)核糖核Ⅲ(RNASEN)
禽腺病PE-CY5標記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIRT3 Antibody核外切1(EXO1)
燦爛類芽胞桿菌Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIX1 Antibody核受體亞家族3C組成員1(NR3C1)
游動放線菌Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIX3 Antibody核受體相關蛋白1(NURR1)
茄腐鐮刀菌PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIRT7 Antibody(PB0376)核仁(NCL)
詹森青霉FITC標記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-SIX6 Antibody核仁磷蛋白3(NPM3)
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS17辣根過氧化物標記的兔抗小鼠k鏈Anti-SKAP1 Antibody核仁磷蛋白2(NPM2)
絲或半胱蛋白水解抑制蛋白1抗體固氮菌屬大鼠主動脈內(nèi)皮細胞提取物
跨膜硫軟骨蛋白聚糖C抗體克氏梭菌大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞提取物
神經(jīng)腫瘤Nova1抗原抗體簇孢匍柄霉大鼠主動脈平滑肌細胞提取物
突觸細胞粘附分子3抗體短柄帚霉大鼠腸微血管細胞提取物
PAK抑制劑(PF-3758309)鏈霉 銻化鎵激錨定蛋白1
弗氏檸檬桿 磷化鎵增殖誘導配體
柱形孢鏈霉 納鐵鋅αL艾杜糖
有柄樹舌靈芝(白芝) 鈦鍶αL艾杜糖
休哈塔假絲酵母 鈦鍶水泡性口炎抗體
土生隱球酵母 氧化鈧(Ⅲ)流感抗體
多形布勒擔子酵母 鋯鉛(II)伊氏錐蟲抗體
曲霉 鈦鉛焦蟲病抗體
中慢生華癸根瘤 氧化鋰西尼羅河病抗體
屎腸球 氧化鈥連蛋白
木賊鐮孢 氧化鉿(IV)轉(zhuǎn)化生長因子β
根瘤 氫氧化鎳球蛋白G1
美澳型核果褐腐病 納鐵鈷球蛋白G2
韓國假單胞 鈦鈣雌二
蛹蟲草（北冬蟲夏草、北蟲草）（可訂購） 鈦鋇球蛋白A
