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中文名稱：KGA和GAC抑制劑(CB-839)
英文名稱：CB-839
產品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10290
產品介紹:
英文名稱：CB-839 產品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg CB-839是一種高效的KGA和GAC的抑制劑，對重組GAC的IC50值小于15nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1439399-58-2 純度：99.69% 分子量：571.57 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
根瘤菌腦蛋白9抗體Human PAEP(Glycodelin) 一氧化氮(NO)
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種絲裂原誘導蛋白2抗體Human PROX1 葉受體α(FOLR1)
解淀粉芽孢桿菌鋅指蛋白393抗體Human PRPF19 葉受體(FOLR)
枯草芽孢桿菌組蛋白賴特異性脫甲基1抗體Human PROSC 葉(FA)
扣囊復膜孢酵母驅動蛋白樣蛋白1抗體（甲狀腺激受體相互作用蛋白5）Human PRPF3 氧化型(GSSG)
宇佐美曲霉組蛋白甲基化KMT3B抗體（雄激受體激活蛋白）Human ZNF335(Zinc finger protein 335) 氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)
黑曲霉離子通道蛋白Kv4.3抗體Human PRPF40A 氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)
枯草芽胞桿菌Killin-p53調節(jié)復制抑制蛋白抗體Human PRKX 氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)
盔狀畢赤酵母賴tRNA的連接抗體Human PRMT1 氧化低密度脂蛋白(OxLDL)
大腸埃希菌220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體Human PRPF40B 氧還原蛋白過氧化物4(PRDX4)
嗜冷生孢八疊球菌磷化220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體Human PRPF6 延伸蛋白A(EloA)
發(fā)根土壤桿菌（發(fā)根植物單胞菌）（現(xiàn)1）基爾曼氏細小病VP1/VP2抗體(大鼠潛在病KRV)C端Human PRMT5(Protein arginine N-methyltransferase 5) 煙酰腺二核磷(NADPH)
灰毛青霉離子通道蛋白家族KCNQ1抗體Human PRMT8 煙酰腺二核(NAD)
褐黃木耳（琥珀木耳）組蛋白H3 K9甲基轉移抗體Human PRMT3 牙骨質蛋白1(CEMP-1)
Paenibacillus thailandensis生物鐘KAT13D蛋白抗體Human PRMT6 牙本質基質蛋白1(DMP1)
柄籃狀菌Kelch樣蛋白36抗體Human PRPF40A 循環(huán)免疫復合物(CIC)
長根小奧德蘑Xerula│radicata (Relhan) Dörfelt 質量規(guī)格：>99.0%(GC)(R型)人參皂Rh1
人蒼白桿菌Ochrobactrum│anthropi 質量規(guī)格：>98.0%(GC)酪
多粘芽孢桿菌Bacillus│polymyxa 質量規(guī)格：用于薄層色譜顯色劑DL-薄荷
KGA和GAC抑制劑(CB-839)尖孢鐮孢 3,3'-二甲基-4,4'-二氨基二環(huán)己烷(異構體的混合物)半乳糖凝集9
Cupriavidus 6-基-2-吡高遷移率族蛋白1
棲土梭孢殼 椰子油二乙酰去乙?；疭irtuin-2
蘇云金芽孢桿松躅亞種 4,6-二-2-甲基-3-吡啶羧乙酯煙酰腺二核；氧化型輔Ⅰ
矩圓黑盤孢 硅鋅果糖-1,6-二磷酯
嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞 C12-14-烷基縮水甘油水痘帶狀皰疹病gE
枯斑擬盤多毛孢 乙基香蘭縮（含異構體）卵清蛋白特異性IgA抗體
地衣芽胞桿 麥芽酯Toll樣受體1
環(huán)發(fā)仙 乙基香蘭縮（含異構體）速激肽3
擬無枝 香蘭縮CXC趨化因子配體6
產黃青霉 二苯甲基硫代乙酰β2糖蛋白I
費氏中華根瘤 N-甲基-2-甲氧基芐血清淀粉樣蛋白A3
聚多曲霉 3-氨基環(huán)己多巴脫羧
維氏氣單胞 二乙苯二（異構體混合物）抗中性粒;中心體抗體
塔賓曲霉 2,2,4-基-1,3-戊二二異丁酯α-羥丁脫氫
