產(chǎn)品介紹:
英文名稱(chēng):GDC-0941 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg GDC-0941是一種有效的PI3Kα/δ抑制劑,IC50值為3nM;對(duì)p110β和p110γ具有適度的選擇性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):957054-30-7 別名:Pictilisib 純度:99.52% 分子量:513.64 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱(chēng):PI3Kα/δ抑制劑(GDC-0941)
英文名稱(chēng):GDC-0941
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號(hào):FS-X10433
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
MG1655 ΔendA ΔrecA (DE3) 纖溶相關(guān)蛋白B2抗體Anti-CCL2 AntibodyEJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)
茯苓多聚合α/β/γ抗體Anti-CCL3 AntibodyEgl九同源物1(EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137)
耐熱裸囊菌含脯突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體Anti-CCL4 AntibodyE3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)
釀酒酵母外周蛋白2抗體Anti-CCL26 AntibodyD-乳脫氫(D-LDH)
乳菌計(jì)數(shù)模擬乳粉質(zhì)控樣品區(qū)帶蛋白PZP抗體Anti-CCL3 AntibodyD二聚體(D2D)
大腸埃希菌蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1β(FTβ)抗體Anti-CCL26 AntibodyDNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子4樣蛋白(DDIT4/RTP801)
局限青霉原鈣粘蛋白15抗體Anti-CCL7 AntibodyDNA甲基轉(zhuǎn)移3A(DNMT3A)
短波單胞菌屬原鈣粘蛋白β2抗體Anti-CCL4 AntibodyDNA甲基轉(zhuǎn)移1(DNMT1)
小單孢菌原鈣粘蛋白β4抗體Anti-CCL4 AntibodyDnaJ同源亞科B成員1(DNAJB1/DNAJ1/HDJ1/HSPF1)
谷棒桿菌原鈣粘蛋白γ10抗體Anti-CCL6 AntibodyDickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)
里亞氏須腹菌原鈣粘蛋白γA4抗體Anti-CCL5 AntibodyDickkopf 3(DKK3)
短小芽孢桿菌原鈣粘蛋白γA2抗體Anti-CCN1 AntibodyDickkopf 1(DKK1)
蠟狀芽孢桿菌原鈣粘蛋白γA5抗體Anti-CCN2 AntibodyDAB2互作蛋白(DAB2IP)
黑曲霉原鈣粘蛋白γA7抗體Anti-CCN2 AntibodyC型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)
奇異硬皮馬勃原鈣粘蛋白γA8抗體Anti-CCN2 AntibodyC型鈉尿肽(CNP)
原鈣粘蛋白γA9抗體Anti-CCL8 AntibodyC肽(C-Peptide)
: HBUM78192資源名稱(chēng): 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
游動(dòng)放線菌菌種Actinoplanes│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:>97%,PI3Kβ選擇性抑制劑
PI3Kα/δ抑制劑(GDC-0941)葡萄座腔 2,4-二-5-(三氟甲基)嘧啶CD68分子
Brenneria nigrifluens Glu-Glu血紅蛋白α亞基
黃曲霉 3,6-二溴噻吩[3,2-b]噻吩血管緊張1-9
三葉草根瘤 1-Boc-3-(甲氨基)彈性蛋白
網(wǎng)脈木耳 3-甲氧基苯肼鹽鹽高靈敏促甲狀腺
釀酒酵母 乙鈉-d3胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-6
細(xì)鏈格孢 4,7-二羥基-1,10-菲羅啉白介17B
出芽短梗霉(黑酵母) Phe-Val四氫孕酮
生芽紅細(xì) 2-(2,4-二氟苯基)吡啶胃泌17
梨生囊殼孢 Trimebutine阿黑皮原
蘇云金芽孢桿庫(kù)爾斯塔克亞種 7-(三氟甲基)靛紅異檸檬脫氫
乳桿屬 2-(3-吡啶)-4-甲基噻唑-5-羧芳香化
豬鏈球(不可提供) 3-氟-4-甲氧基苯甲酰類(lèi)固急性調(diào)節(jié)蛋白
乙型副傷門(mén) 6'-甲氧基-2'-乙酰萘膽固側(cè)鏈裂解
鏈球(不定種) 2,3-二甲基-4-甲氧基苯甲棕櫚酰