Gram-Twort革蘭染色液正在熱銷的產(chǎn)品：Phospho-Bad(Ser136) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體IgG去氫膽 98.5%
Phospho-Bad(Ser155) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體IgG脫氧膽鈉 98%
BADH2/FITC 熒光標(biāo)記BADH2抗體IgG膽鈉 98%
BAFF/CD257/FITC 熒光
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
中文名稱：Gram-Twort革蘭染色液
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：4×100ml
貨號：FS-X10100
產(chǎn)品介紹:
用途： 組織切片的革蘭氏細(xì)菌染色 注意事項(xiàng)： Gram-Twort革蘭染色液采用非經(jīng)典的革蘭染色配方， 用到紅色和綠色染料，使色彩較為豐富，背景干凈，胞核胞質(zhì)對比強(qiáng)烈，細(xì)菌染色特征典型，多用于組織切片的染色。 儲存條件：室溫，避光，12個月 |
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
Pseudoxanthomonas動力蛋白激活蛋白6抗體Human RERGL (Ras-related and estrogen-regulated growth inhibitor-like protein) 人α-黑色激(α-MSH)免疫試劑盒
絨奧德蘑脫2抗體Human RASSF1 (Ras association domain-containing protein 1) 人αS轉(zhuǎn)移(α-GST)免疫試劑盒
斑點(diǎn)青霉磷化DNA依賴性蛋白激抗體Human RHEBL1 (GTPase RhebL1) 人α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
耐寒短桿菌防御α4抗體Human R3HCC1 (R3H and coiled-coil domain-containing protein 1) 人α-輔肌動蛋白4(ACTN-4)免疫試劑盒
圈卷產(chǎn)色鏈霉菌DNA損傷結(jié)合蛋白1抗體Human SPDEF (SAM pointed domain-containing Ets transcription factor) 人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)免疫試劑盒
炭疽健康皮張抗原DNA損傷結(jié)合蛋白2抗體Human RTBDN (Retbindin) 人α-輔肌動蛋白1(ACTN-1)免疫試劑盒
凝結(jié)芽胞桿菌CD299抗體Human PEAK1 (Pseudopodium-enriched atypical kinase 1) 人α-防御4(NP-4)免疫試劑盒
巨大芽孢桿菌C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體Human R3HDML (Peptidase inhibitor R3HDML) 人α淀粉(AMY1)免疫試劑盒
雅致放射毛霉C型凝集結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體Human PTK2B (Protein-tyrosine kinase 2-beta) 人α半乳糖基(α-Gal)免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌B淋巴銜接分子DAPP1抗體Human RABGAP1 (Rab GTPase-activating protein 1) 人α半乳糖(αGAL)免疫試劑盒
微小根毛霉DNA1樣蛋白1抗體Human PINK1(Serine/threonine-protein kinase PINK1, mitochondrial) 人αN已?；咸?αNAG)免疫試劑盒
根瘤菌抗菌蛋白DCD抗體Human PURB (Transcriptional activator protein Pur-beta) 人αL巖藻糖(AFU)免疫試劑盒
畢赤酵母肌動蛋白解聚因子抗體Human REP15 (Rab15 effector protein) 人αL艾杜糖(IDUA)免疫試劑盒
斯瓦特貝赫山克里布所菌甘油二酯酰基轉(zhuǎn)移2抗體Human RABIF (Guanine nucleotide exchange factor MSS4) 人α2抗纖溶(α2-AP)免疫試劑盒
中國臺灣根霉DHX15蛋白抗體Human PURG (Purine-rich element-binding protein gamma) 人α2巨球蛋白(α2-MG)免疫試劑盒
頂孢頭孢霉DIAPH2蛋白抗體Human RALGPS1 (Ras-specific guanine nucleotide-releasing factor RalGPS1) 人α2-HS糖蛋白(AHSG)抗體免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：100μg/mL，基體:1%HNO3谷單鈉鹽
除烴海桿菌Marinobacter│hydrocarbonoclasticus 質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：鵝去氧膽
日本慢生根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質(zhì)量規(guī)格：1000µg/mL,基體:1%HCl去氧膽鈉
Gram-Twort革蘭染色液病臭腸球 絲氨鹽鹽色合成
薄花邊傘2-4 4-溴-2-甲氧基羧肽
玉大斑病 甘氨酰-L-絲植
蟲形珊瑚 三乙三氫氟鹽過氧化氫
熒光假單胞 奧拉唑精合成
枯草芽胞桿枯草亞種 4-溴-2-吡啶精脫羧
Candidatus Rhizobium 4-(3-基)嗎啉鳥脫羧
節(jié)桿 辛銠(II)二聚體S-腺蛋脫羧
動物雙歧桿 1-甘露糖野尻霉鹽鹽磷糖異構(gòu)
大腸埃希氏 反式-2,3-二甲氧基肉桂ω-3脂肪脫氫
大腸埃希氏桿 反式2-溴肉桂核糖體蛋白S9
隆氏針層孔 異辛硫核糖體
深紅酵母 乙肼蘆丁降解
堿線屬 (S)-(-)-β-羥基-蘆丁降解
薄層 2-溴-5-吡啶5-烯式酮酰莽草-3-磷合
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
