操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
SGC-CBP30 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | FS-X10621 |
產(chǎn)品介紹:
SGC-CBP30是強(qiáng)效的CREBBP/EP300抑制劑,無細(xì)胞試驗(yàn)中IC50分別為21~69nM和38nM。對(duì)CBP的選擇性分別是對(duì)BRD4(1)和BRD4(2)選擇性的40倍和250倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):1613695-14-9 純度:99.19% 分子量:509.04 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
膠胞羅丹明標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC5A2 Antibody過氧化物體增殖物激活受體γ(PPARγ)
草菇Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC5A1 Antibody過氧化物體增殖物激活受體α(PPARα)
鏈霉菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A1 Antibody過氧化物體生物合成因子2(PEX2)
蠟狀芽孢桿菌Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A1 Antibody過氧化還原6(PRDX6)
嗜堿假單胞菌Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過氧化還原5(PRDX5)
棱柱散尾菌PE標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過氧化還原4(PRDX4)
榛針孢酵母FITC標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過氧化還原3(PRDX3)
枯草芽孢桿菌生物標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過氧化還原2(PRDX2)
Cy5標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC7A5 Antibody過氧化還原1(PRDX1)
釀酒酵母生物標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC7A1 Antibody過氧蛋白同源物(PXDN)
解橡膠諾卡氏菌FITC標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC7A3 Antibody果糖二磷縮C(ALDOC)
土壤桿菌羅丹明標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC9A2 Antibody果糖-3-激(FN3K)
尖鐮孢PE-Cy3標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC9A1 Antibody(PB0176)歸巢關(guān)聯(lián)黏附分子(HCAM)
德蘭士瓦哈薩克斯坦酵母 PE-CY5標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC9A3R1 Antibody胱天蛋白激活脫氧核糖核(CAD)
Ohtaekwangia koreensisAPC標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLIT2 Antibody胱天蛋白9(P9)
泳池鞘單胞菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLK Antibody胱天蛋白8(P8)
增殖相關(guān)核仁抗原抗體芽枝狀枝孢大鼠卵巢顆粒細(xì)胞提取物
富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌大鼠子宮成纖維細(xì)胞提取物
NALP12抗體嚙蝕艾肯菌大鼠卵巢上皮細(xì)胞提取物
富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體伯頓擬內(nèi)孢霉大鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物
CREBBP/EP300抑制劑(SGC-CBP30)平流層芽孢桿 1,8-辛二硫熱休克蛋白90
糞腸球 1,6-己二硫地塞松
紅球 (+)-δ-維生B1
青霉屬 2'-羥基苯乙酮天門冬氨基轉(zhuǎn)移
布魯氏 R-2-氨甲基吡咯烷天門冬氨基轉(zhuǎn)移
藤黃微球 (S)-(氨甲基)-1-BOC-吡咯烷血清淀粉樣蛋白A
貪噬 三(4-甲酰苯基)C-反應(yīng)蛋白
葉生布勒擔(dān)子酵母 (S,S)-2,6-雙(4-異基-2-惡唑啉-2-基)吡啶結(jié)合珠蛋白
平菇 2'-羥基苯乙酮維生D
范巴倫氏分支桿 2,6-二硫α1性糖蛋白
蘋果黑腐皮殼 乙-D4γ谷氨酰轉(zhuǎn)移
淺白隱球酵母 N'-(2-芐氧羰基)-L-鳥谷脫氫
大腸埃希氏桿 4-異基苯基肼鹽鹽γ谷氨酰轉(zhuǎn)移
蠟狀芽孢桿 Tyrphostin 23谷脫氫
魯氏接合酵母 1-萘性T相關(guān)抗原4