操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Z-DEVD-FMK | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg | FS-X10374 |
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Z-DEVD-FMK 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg Z-DEVD-FMK是一種特異性的caspase-3抑制劑,IC50為18μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):210344-95-9 別名:Caspase-3 Inhibitor 純度:98.0% 分子量:668.66 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
植物乳桿菌植物亞種磷化中心粒蛋白Nudel抗體Human TLR2(Toll-like receptor 2) 基質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)
吸水鏈霉菌磷化中心粒蛋白Nudel抗體Human TLR3(Toll-like receptor 3) 基質(zhì)金屬蛋白4(MMP-4)
pMV306hsp+LuxG13(addgene26161)線粒體復(fù)合物NDUFS4蛋白抗體Human TNFβ(Tumor Necrosis Factor Beta) 基質(zhì)金屬蛋白3/基質(zhì)裂解1(MMP3/STR1)
豌豆根瘤菌NADH脫氫α家族8抗體Human VEGFR2/KDR(Vascular endothelial growth factor receptor 2) 基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)
枯草芽孢桿菌NADH脫氫黃蛋白1抗體Human TNFRSF11A/RANK(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A) 基質(zhì)金屬蛋白25(MMP25)
立枯絲核菌NADH脫氫黃蛋白2抗體Human TNFRSF14/HVEM(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14) 基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
多主葡萄殼菌NADH氧化還原輔1抗體Human TNFRSF9/4-1BB(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9) 基質(zhì)金屬蛋白2(MMP-2)
食鹿角菜假交替單胞菌膜內(nèi)在蛋白NOD26抗體Human TNFSF13/APRIL(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13) 基質(zhì)金屬蛋白1原(Pro-MMP-1)
番茄枯萎病菌磷化谷受體2B抗體Human TNFRSF4/OX40(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4) 基質(zhì)金屬蛋白14(MMP-14)
膠凍樣類芽孢桿菌磷化谷受體2A+2B抗體Human TNFRSF5/CD40(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5) 基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)
頂孢頭孢霉高度相似的周期蛋白激NEK6抗體Human TNFSF11/RANKL(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 11) 基質(zhì)金屬蛋白12(MMP-12)
枯草芽孢桿菌A型流感病-NS1抗體(神經(jīng)1)Human TNFSF4/OX40L(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4) 基質(zhì)金屬蛋白11(MMP11)
高山被孢霉去甲腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體Human TNFSF14/LIGHT(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 14) 基質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)
構(gòu)巢曲霉磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體Human TNFSF18(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 18) 基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)
草生毛霉新的飽食分子蛋白抗體Human TGFBR2(TGF-beta receptor type-2) 基質(zhì)γ羧基谷蛋白(MGP)
小孢根霉須狀變種脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白4抗體Human TGFβ1(Transforming Growth Factor Beta 1) 基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)
炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品丹參IIA
蛇孢霉屬Polyscytalum│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR丹B
灰藤黃鏈霉菌Streptomyces│griseoluteus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR丹A
caspase-3抑制劑(Z-DEVD-FMK)環(huán)狀芽胞桿 三環(huán)己基膦四氟鹽血管緊張I
薔薇放線孢* 3-羥基-4-甲血管緊張I受體抗體
粗糙脈孢 L-β-高鹽鹽血管緊張?jiān)?/span>
健康皮張抗原(豬皮1) 3,5-二芐氧基甲酯血管緊張轉(zhuǎn)化
雷丸* α,β-海藻糖血管緊張轉(zhuǎn)換2
土地芽孢桿 4'-羥基聯(lián)苯基-4-羧血管內(nèi)皮鈣粘蛋白
弗氏弧 2,2-二甲基丁酰血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子
弗雷德里克斯堡假單胞 2,2-二甲基丁酰血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A
伯氏致病桿 2,7-二溴萘血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B
枯草芽孢桿 2,4,6-三氟苯甲血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C
澳大利亞平臍蠕孢 2,4-二溴吡啶血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1
叢赤殼 (1S,2S)-二(4-甲氧基苯)-1,2-乙二血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2
大腸埃希氏桿 2-吡啶-4-羧血管內(nèi)皮蛋白C受體
釀酒酵母 1,1-雙[4-[N,N-二(對(duì)甲苯基)氨基]苯基]環(huán)己烷血管內(nèi)皮粘附分子1
小單孢 Boc-3-(2-萘基)-L-血管生成1