Dacie氏液正在熱銷的產(chǎn)品：MMP-11 質(zhì)金屬蛋白-11抗體高純氧化鈮 光玻級99.99%
MMP-12 質(zhì)金屬蛋白-12抗體氧化鈮 AR,99.9%
Beta-2-MG β2微球蛋白抗體(單抗)氧化鈮 99.95%,冶金級
MOG 髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白抗體氧化鈮 SP
Moesin 膜突蛋白抗體氧化鉭 SP
Mouse IgA IgA抗體氧化鉭(V) 99.99% metals
中文名稱：Dacie氏液
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100ml
貨號：FS-X9920
產(chǎn)品介紹:
用途： 用于紅細(xì)胞計數(shù) 注意事項： 由檸檬酸鈉，等組成。 儲存條件：室溫，12個月 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
斜頂菌BMP內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白抗體Human HAL 小鼠低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒
相思根瘤菌肝病NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體Human HAPLN4 小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測免疫試劑盒
聚貪氏菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切抗體Human hamartin 小鼠蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體Human HAO1 小鼠蛋白激B(PKB)免疫試劑盒
Nocardioides微管蛋白β輔助因子D抗體Human HAP1 小鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒
非脫羧勒克菌鈣粘蛋白相關(guān)蛋白受體BTR1抗體Human Harmonin 小鼠乙酰轉(zhuǎn)移(ChAT)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌有絲分裂蛋白BUB3抗體Human HARS2 小鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)免疫試劑盒
球孢白僵菌p60TRP蛋白抗體Human HAT1 小鼠膽固(CH)免疫試劑盒
赭色擲孢酵母博萊霉水解抗體Human GYG1 小鼠單克抗體亞型鑒定免疫試劑盒
釀酒酵母短蛋白聚糖抗體Human GUCY1B3 小鼠單核趨化蛋白5(MCP-5)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human GTSE1 小鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒
耶納農(nóng)球菌巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體Human GTPBP5 小鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌堿性亮拉鏈蛋白BZW1抗體Human GUCY2D 小鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫試劑盒
Bacillus tequilensis 骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體Human GUCY1A3 小鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
*正紅菇Bcl2相互作用蛋白1抗體（轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白）Human GUCY2F 小鼠大內(nèi)皮(Big ET)免疫試劑盒
豬丹絲菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體Human GUF1 小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRβ-轉(zhuǎn)導(dǎo)重復(fù)序列包含蛋白試劑盒雙草鹽
優(yōu)雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 質(zhì)量規(guī)格：BRβ抑制蛋白2試劑盒甘草堿
擬諾卡氏菌屬菌種Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：商品級β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白試劑盒沙蟾精
Dacie氏液嗜熱鏈球 乙酰基乙酰對苯同種異體移植炎癥因子1
Ramlibacter tataouinensis 4'--4-氨基二苯轉(zhuǎn)化生長因子β受體1
產(chǎn)氮假單胞（可定） 單氟磷鈉聚(ADP核糖)聚合1
莫哈韋芽孢桿 基磺酰乙型肝炎病表面IgG抗體
變綠肉座 [1,3-雙(2,4,6-三基)-2-咪唑烷亞基][2-[[(4-基)亞氨基]甲基]-4白介28D
少孢酵母 2--4-氟苯白喉IgG抗體
盤多毛孢 萘酯電壓門控通道抗體
短小克銀漢霉 -5-甲甲酯7-脫氫膽固
釀酒酵母 2-(1-哌基)瘤病16型E6蛋白
雞傷門氏 2-羥基苯并噻唑
黑曲霉 DL-2-(3-苯氧基)/調(diào)果血紅氧合1
球孢白僵 O-去甲游離型肝炎病核心抗原
釀酒酵母 2--1,4-萘醌白介8受體α
微桿屬 丁-1,1-二甲基-2-苯乙酯白介8受體β
產(chǎn)堿假單胞 4-溴-1H-吡咯-2-羧甲酯膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白
