RET激酶抑制劑(AST 487)正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：Cobra venom factor,CVF ELISA Kit 蛇因子化 分子生物學(xué), ≥99.5%
bullfrog growth hormone,GH ELISA Kit 牛蛙生長(zhǎng)激化 培養(yǎng), ≥99.5%
Bombyx mori Livetin,LT ELISA Kit 家蠶卵黃蛋白重鉻 AR,99.8%
Nasoniavitripe
產(chǎn)品介紹:
AST487是一種RET激酶抑制劑，IC50為880nM，抑制RET自磷酸化，及下游效應(yīng)器激活，也抑制Flt-3，IC50為520nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：630124-46-8 別名：NVP-AST 487 純度：98.64% 分子量：529.56 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱：RET激酶抑制劑(AST 487)
英文名稱：AST 487
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
貨號(hào)：FS-X11057
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
線粒體DNA拓普西異構(gòu)meiⅠ抗體 MT
CD90抗體 CD90 / Thy1
突觸融合蛋白結(jié)合蛋白5抗體 Tomosyn/STXBP5
UNC80蛋白抗體 UNC80
四分子交聯(lián)體4抗體（四旋蛋白） TSPAN4
轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體 TBX18
干燥綜合征相關(guān)蛋白2抗體 TROVE-2
jia狀腺激su受體相互作用蛋白4抗體 TRIP4
轉(zhuǎn)錄因子E2F二聚體蛋白2抗體 TFDP2
TIP30蛋白抗體 TIP30
β-taxilin蛋白抗體 TXLNB
酪蛋白硫suan轉(zhuǎn)移mei1抗體 TPST1
RET激酶抑制劑(AST 487)薏苡鏈格孢 Sarcandrolide D
球形賴芽孢桿 Rauvotetraphylline E
產(chǎn)單核李氏桿 Raucaffricine
大豆慢生根瘤 Protoplumericin A
黑腐皮殼 霹靂蘿芙辛堿
南海紅球 Ocotillone
豬丹絲 蕊木堿甲酯
姬松茸* 辛夷烯酮
匍枝根霉(黑根霉) 7-Geranyloxy-5-methoxycoumarin
黃曲霉 Larixinol
香菇 Jolkinol A
橙色鹽單胞 2,5,14-三乙酰氧基-3-苯甲酰基氧基-8,15-二羥基-7-異丁酰氧基-9-煙酰氧基氧基-6(
彩色豆馬勃 Isokadsurenin D
鼠李糖乳桿 Isoerysenegalensein E
榿木鏈霉 Erysenegalensein E
