ERRα反向激動(dòng)劑(XCT-790)正在熱銷的產(chǎn)品：Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)半胱氨肽4醋鈰 99.9% metals basis
PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人
英文名稱：XCT790
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg
貨號(hào)：FS-X10804
產(chǎn)品介紹:
XCT-790是雌激素相關(guān)受體（ERR）α反向激動(dòng)劑，能誘導(dǎo)化療抗性的癌細(xì)胞死亡。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：725247-18-7 純度：98.01% 分子量：596.42 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
松杉靈芝大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激Anti-NDRG4 Antibody人組織蛋白K(cath-K)
葡萄座腔菌大鼠檸檬合Anti-NDUFA4L2 Antibody人組織蛋白K(cath-K)
釀酒酵母兔子血小板因子4Anti-NDUFA9 Antibody人骨形成蛋白(BMPs)
爪哇鏈霉菌植物維生CAnti-NDUFA4L2 Antibody人骨形成蛋白(BMPs)
矩圓黑盤孢小鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6Anti-NDUFA8 Antibody人視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)
sto128(大球蓋菇)人集落激因子Anti-NDUFB1 Antibody人視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)
灰藍(lán)毛霉兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白Anti-NDUFB9 Antibody人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)
污水溶桿菌人γ干擾誘導(dǎo)單核因子Anti-NDUFS5 Antibody人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)
深紅酵母α-銀環(huán)蛇Anti-NDUFB10 Antibody人垂草扁桃(VMA)
煙曲霉小鼠巨噬炎性蛋白1δAnti-NDUFA9 Antibody人垂草扁桃(VMA)
黑曲霉大鼠L-鼠乳脫氫Anti-NDUFC2 Antibody人葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)
腸沙門氏菌腸亞種嬰兒血清型大鼠脂酰合成Anti-NDUFV3 Antibody人葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)
黑曲霉人肥胖抑制Anti-NECTIN1 Antibody人血凝(HA)
根瘤菌屬小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子Anti-NDUFV2 Antibody人血凝(HA)
克魯斯假絲酵母兔子中性粒彈性蛋白Anti-NECAB3 Antibody人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)
枯草芽胞桿菌枯草亞種蘇云金芽孢桿菌蛋白Anti-NECTIN2 Antibody人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)
鳥核交換因子抗體黑荊樹根瘤菌人膀胱癌細(xì)胞（2014年9月新引進(jìn)）（干細(xì)胞庫保藏）
核糖體結(jié)合因子RBFA抗體中國臺(tái)灣相思根瘤菌人絨毛膜癌細(xì)胞
環(huán)指蛋白166抗體南洋楹根瘤菌小鼠白血病克細(xì)胞系
環(huán)指蛋白19B抗體假木豆根瘤菌人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
ERRα反向激動(dòng)劑(XCT-790)地衣芽孢桿 改良MS-H培養(yǎng)基戊型肝炎病抗原
長枝木霉 WLN培養(yǎng)基前列腺E合2
土曲霉 硫代苯甲酰血紅
假單胞 梭屬測定用培養(yǎng)基阿霉
加利福尼亞犁頭霉 營養(yǎng)瓊脂內(nèi)皮受體A
甲基營養(yǎng)型芽胞桿 SB培養(yǎng)基內(nèi)皮受體B
膠孢 明膠磷鹽緩沖液Ⅲ型膠原
綠穗霉 C81V培養(yǎng)基脂蛋白脂
哈茨木霉 脆弱擬桿活化培養(yǎng)基肉湯肝脂
枯草芽孢桿 ModifiedSclohtens'Broth(MSB)鎖鏈
束狀盤孢 含1%水楊的PY培養(yǎng)基尿
Rhizobium 含1%棉籽糖的PY培養(yǎng)基半胱蛋白13
卡爾斯伯酵母 PPLO瓊脂增殖核抗原
解肝磷脂土地桿 精肉湯果糖二磷縮A
中國臺(tái)灣卓貝爾氏 葡萄糖肉湯果糖二磷縮A
