人I型PRMTs抑制劑(MS023)正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：IFN Alpha-Ab(Human Interferon AlphaAntibody) ELISA Kit 人抗α干擾抗體馬鈴薯瓊脂 BR
Sc1-70-Ab(Human Sc1-70 Antibody) ELISA Kit 人抗Sc1-70抗體馬鈴薯葡萄糖瓊脂 BR
Jo1/HRS(Human Jo-1 Antibody) ELISA K
中文名稱(chēng)：人I型PRMTs抑制劑(MS023)
英文名稱(chēng)：MS023
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號(hào)：FS-X10751
產(chǎn)品介紹:
MS023是一種有效的，有細(xì)胞活性的，選擇性人I型PRMTs抑制劑，IC50為4-119nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：1831110-54-3 純度：99.84% 分子量：287.4 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
光黑腹菌生物偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-GPBAR1 Antibody人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)
凍膠假絲酵母生物偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPC1 Antibody人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)
湖底肉桿菌BK通道蛋白多肽Anti-GPC5 Antibody人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
金灰青霉重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2Anti-GPR1 Antibody人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
Acinetobacter preuotii sp.重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白7Anti-GPR107 Antibody人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)
門(mén)多薩假單胞菌炭疽桿菌菌體蛋白Anti-GPR101 Antibody人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)
黃叉曲霉CD105蛋白Anti-GPR119 Antibody人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)
菌核青霉瓜環(huán)肽Anti-GPR108 Antibody人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)
大腸埃希菌C-反應(yīng)蛋白（抗原）Anti-GPR12 Antibody人透明質(zhì)(HA)
癭青霉克侖特羅偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPR132 Antibody人透明質(zhì)(HA)
膜醭假絲酵母克侖特羅偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-GPR135 Antibody人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)
香菇畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗原(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)N端Anti-GPR132 Antibody人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)
芽孢桿菌角蛋白19多肽抗原Anti-GPR137C Antibody人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)
白色類(lèi)諾卡氏菌人癌胚抗原抗原Anti-GPR142 Antibody人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)
冷桿菌CD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗原Anti-GPR139 Antibody人層連蛋白/板層(LN)
棘抱曲霉半胱蛋白蛋白-6（抗原）Anti-GPR143 Antibody人層連蛋白/板層(LN)
痙攣性截癱相關(guān)蛋白21抗體謝氏桿菌人軟骨肉瘤細(xì)胞
G蛋白結(jié)合蛋白3抗體丁梭菌（丁桿菌）小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
SPG48蛋白抗體痤瘡桿菌人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞
痙攣性截癱蛋白7/基質(zhì)細(xì)胞粘附調(diào)節(jié)蛋白抗體生孢梭菌（產(chǎn)芽孢梭狀芽孢桿菌）人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
人I型PRMTs抑制劑(MS023)釀酒酵母 牛肉浸粉25羥基維生D
血桿 3-氨基-4-甲氧基線粒體呼吸鏈復(fù)合物I
海洋桿 瓊脂糖煙酰腺二核
枯草芽孢桿 細(xì)學(xué)瓊脂雌馬
屎腸球 4-氨基-3-大豆異黃酮
Bacteroides sp. 酵母粉布氏桿抗體
島生異擔(dān)子 胰蛋白胨還原型輔Ⅰ
催娩克雷伯氏 2-氨基-5-線粒體呼吸鏈復(fù)合物II
遲緩愛(ài)德華氏 供體馬血清線粒體呼吸鏈復(fù)合物III
淡藍(lán)褐糖絲 5-氨基鄰甲線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV
蜂頭蟲(chóng)草 胎牛血清[南美血清]激肽釋放3
熒光威克酵母 2-氨基二苯甲酮心水病抗原
白僵 青霉鏈霉溶液 雙抗球蛋白E
白色鏈霉白色變種 胰蛋白溶液球蛋白G1
大腸埃希 對(duì)氨基苯甲酰α酪蛋白
