抗凋亡蛋白BCL-2抑制劑(Obatoclax)正在熱銷的產(chǎn)品：IL-6 人白介-6烯, CP,>98%(GC)
sIL-6R/gp130 人可溶性白介-6受體烯, GR,>99.5%(GC)
IL-8 人白介-8烯丁酯（BA） GCS,≥99.5% (GC)
IL-10 人白介-10烯丁酯 AR,99%
IL-11 人白介-11烯丁酯 CP,98%
IL-12 人白介-12烯丁酯 ，
產(chǎn)品介紹:
Obatoclax是抗凋亡蛋白BCL-2的抑制劑，對抗凋亡蛋白BCL-2的平均IC50值為3μM，包括2.9μM(Mcl-1)和5μM(Bfl-1)。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：803712-79-0 別名：Obatoclax Mesylate;GX15-070 純度：99.20% 分子量：413.49 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
英文名稱：Obatoclax
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10632
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
皺褶莫氏黑粉菌生物標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-STMN1 Antibody(PB0596)肝配蛋白A3(EFNA3)
平菇Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-STS Antibody肝配蛋白A2(EFNA2)
雅致枝霉PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-STRAP Antibody(PB0476)肝配蛋白A1(EFNA1)
苔草草拉氏桿菌*PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-STX1A Antibody肝膠原凝集1(CLL1)
球毛殼菌（可訂購）Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-STXBP1 Antibody肝腸鈣黏蛋白(CDH17)
異常漢遜酵母異常變種Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SUB1 Antibody(PB1138)肝癌源性生長因子(HDGF)
腐皮殼屬Cy5標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-STXBP2 Antibody甘油激(GLYCTK)
松口蘑Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SUFU Antibody甘油-3-磷脫氫(GAPDH)
嗜水氣單胞菌Cy7標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SULT2B1 Antibody甘油磷肌錨定高密度脂蛋白結(jié)合蛋白1(GPIHBP1)
空泡單胞菌PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SUZ12 Antibody甘油磷二酯磷二酯1(GDE1)
亮白曲霉PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SYCP3 Antibody甘油磷磷二酯(GPCPD1)
靈芝PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SYK Antibody甘油磷-O-?；D(zhuǎn)移(GNPAT)
頭狀莖點霉APC標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SULT2A1 Antibody甘油激5(GK5)
平菇生物標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SUMO1 Antibody甘油激2(GK2)
蠟狀芽孢桿菌辣根過氧化物標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SYK Antibody甘油激(GK)
淡紫擬青霉Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SYN1 Antibody甘露糖受體C2(MRC2)
多胺調(diào)制因子結(jié)合蛋白1抗體枯草芽孢桿菌噬菌體肺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物
B淋巴細(xì)胞白血病前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子3抗體葡萄球菌屬原代組織提取物
B淋巴細(xì)胞白血病前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體青霉屬人血管組織提取物
B淋巴細(xì)胞白血病前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子2抗體甲基桿菌屬人髂動脈組織提取物
抗凋亡蛋白BCL-2抑制劑(Obatoclax)原小單胞 (1S,2S)-2-(Diphenylphosphino)-2,3-dihydro-1H-inden環(huán)氧化2
雞傷門氏 4,4'-雙(羥甲基)-2,2'-二吡啶吻
Flavihumibacter 1-噻蒽色羥化1
瓶形毛殼 二苯并噻吩-4-糖皮質(zhì)
惡臭假單胞 3-氨基-2-鹽皮質(zhì)
繩狀籃狀 二芐基 N,N-二異基亞磷酰5-羥基色
異常威克漢姆酵母 異胞嘧啶吻54
枯草芽孢桿 乙酰酮鋅抗泰勒焦蟲病
冠突曲霉 tert-Butyl N-[3-(Aminomethyl)benzyl]carbamate弓形蟲
嬰兒芽胞桿 四氨合化鉑 水合物旋毛蟲
蘇云金芽孢桿 重去甲腎上腺一水合物傳染性胸膜肺炎
尿八疊球 1,4-哌二乙磺二鹽(PIPES-K2)魏氏梭病
西藏根瘤 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphate (sodium salt梭抗體
釀酒酵母 POPSO 倍半鈉鹽硫代反應(yīng)物
腦膜炎膿性黃桿(P2實驗室資質(zhì)證明) γ-戊內(nèi)酯球蛋白
