Akt1/Akt2/Akt3活性抑制劑正在熱銷的產品：E2F4 轉錄因子E2F-4抗原鈉標準溶液 1000μg/ml
E2F6 轉錄因子E2F-6抗原鈉標準溶液 500mg/L，溶劑：水
E2 tag E2 tag多肽抗原鈉標準溶液 1000µg/mL，體:1%HCl
EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質谷氨運載蛋白3抗原
產品介紹:
AKT inhibitor VIII是一種細胞滲透的喹喔啉化合物，能夠有效的，選擇性的，可逆的抑制Akt1，Akt2和Akt3的活性，IC50值分別為58nM，210nM和2119nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：612847-09-3 純度：99.14% 分子量：551.64 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱：Akt1/Akt2/Akt3活性抑制劑
英文名稱：AKT inhibitor VIII
產品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10535
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
南游動球菌轉移生長因子β3抗體（TGFβ3）Anti-KIF20B Antibody嗜粒趨化因子(ECF)
大腸埃希氏菌轉移生長因子β受體2抗體（TGF-βRⅡ，TGFβRⅡ）Anti-KIF3A Antibody嗜乳脂蛋白亞家族1成員A1(BTN1A1)
香菇轉移生長因子β受體1抗體Anti-KIN Antibody嗜鉻蛋白B(CHGB)
克魯斯假絲酵母甲狀腺過氧化物抗體Anti-KIF2C Antibody(PB0228)嗜鉻蛋白A(CHGA)
彎曲假單胞菌腫瘤壞死因子受體1相關死亡域蛋白抗體Anti-KIN Antibody視紫質(RHO)
釀酒酵母生精凋亡相關基因3抗體Anti-KISS1R Antibody視錐蛋白樣蛋白1(VSNL1)
弓形蟲(QHO株)狀腺T3抗體Anti-KISS1R Antibody視網膜劈裂蛋白(RS)
丁梭菌按蚊硫酯包含蛋白-1抗體Anti-KIT Antibody視網膜母瘤蛋白1(RB1)
發(fā)酵假絲酵母端粒結合蛋白P23抗體Anti-KITLG Antibody視網膜鈣黏附蛋白(RCAD)
釀酒酵母生精凋亡相關基因6抗體Anti-KIT Antibody(PB0240)視神經蛋白3(OPA3)
葉生布勒擔子酵母酪激C抗體(神經生長因子受體的一種)Anti-KITLG Antibody視變誘導反應蛋白(OPTN)
大腸埃希氏桿菌原肌球蛋白抗體Anti-KITLG Antibody視黃脫氫8(RDH8)
圓錐曲霉促甲狀腺受體抗體Anti-KLF3 Antibody視黃脫氫5(RDH5)
單胞菌屬促甲狀腺受體抗體（C端）Anti-KLF4 Antibody視黃脫氫15(RDH15)
產氣莢膜梭菌 C型磷化轉化生長因子β活化激1Anti-KLF4 Antibody視黃脫氫14(RDH14)
豬丹絲菌磷化NF-κB活化激抗體Anti-KLF4 Antibody視黃脫氫13(RDH13)
信號肽肽SPP抗體具核梭桿菌聚核亞種大鼠肺動脈成纖維細胞
溶質載體鋅轉運3抗體巴氏芽孢桿菌大鼠氣管和支氣管上皮細胞
核轉錄因子SOX22抗體艱難梭菌大鼠肺大靜脈內皮細胞
核轉錄因子SOX4抗體出血性大腸埃希氏菌 O157：H7大鼠支氣管成纖維細胞
Akt1/Akt2/Akt3活性抑制劑 2-(三氟甲氧基)苯異酯脫
Au（黑木耳） Captisol色C
巧克力色微桿 4-氟萘-1-色P450
Ag13（蘑菇） 2--5-(三氟甲基)苯色P450 19A1
釀酒酵母 4-氟-2-三氟線粒體促凋亡蛋白
巴氏葡萄球 4-(2-四氫吡喃氧基)苯小膠質標志物
東方伊薩酵母 （基硅烷）甲基化鋰新城疫病IgA抗體
Methylobacterium 3,4,5-氧基苯新城疫病IgG抗體
煙曲霉 Tiadinil中間體4 - 甲基-1,2,3 - 噻二唑-5 - 羧新城疫病sIgA抗體
根霉 Nα-Fmoc-L-2,3-二氨基新城疫病抗體
松口蘑 二肉豆蔻酰磷脂酰（DMPC）雄
芽孢桿 溴螨酯血管活性腸肽
彎曲芽孢桿 溴螨酯血管內皮生長因子
大麗輪枝霉 溴螨酯血糖
蠟狀芽孢桿 環(huán)匹阿尼一氧化氮
