公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | DT40 | 貨號 | AXB9815 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | DT40：DT40 |
分類 | 其它系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | DT-40 |
年齡（性別） | 1日齡 |
組織來源 | 法氏囊，淋巴瘤 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 |
詳情介紹 | DT40細(xì)胞是Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的細(xì)胞系。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到，法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后，建立了DT40細(xì)胞。DT40細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表達(dá)的c-myc RNA水平較高。DT40細(xì)胞缺少一個正常c-myc基因，但含有兩個拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。DT40細(xì)胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。在IgL位點，DT40??? |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM＋0.05mM β-mercaptoethanol＋10% Tryptose Phosphate Broth＋5% Chicken Serum＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~48 hours |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-2111 DSMZ; ACC-636 |
細(xì)胞凍存注意事項：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品：
CD97抗體 英文名；CD97蛙皮素受體3抗體 英文名；Brs3
CD98輕鏈抗體 英文名；SLC7A5外紡錘體極樣蛋白1抗體 英文名；Separase
CD98重鏈抗原抗體 英文名；CD98外殼蛋白COPE單克隆抗體 英文名；COPE
CD99抗體 英文名；CD99外殼蛋白COPE抗體 英文名；COPE
CD99樣蛋白2抗體 英文名；CD99L2外殼蛋白COPG-γ抗體 英文名；COPG
CD9蛋白抗體 英文名；CD9外殼蛋白γ2-COP抗體 英文名；COPG2
CD9重組兔單克隆抗體 英文名；CD9外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體 英文名；EDA
CDC42結(jié)合蛋白激酶α/MRCKα抗體 英文名；MRCK alpha外胚層發(fā)育不良蛋白抗體 英文名；EDA
CDC42效應(yīng)蛋白3抗體 英文名；CDC42EP3外胚層神經(jīng)皮層蛋白1/KLHL35抗體 英文名；ENC1
CDK2相互作用蛋白抗體 英文名；CINP外生性骨疣樣蛋白2抗體 英文名；EXTL2
DT40CDK5和ABL1酶底物1抗體 英文名；CABLES1外致密纖維蛋白3B抗體 英文名；ODF3B
CDK5激活結(jié)合蛋白1抗體 英文名；CDK5RAP1外周苯二氮受體抗體 英文名；TSPO/PBR
CELF3蛋白抗體 英文名；CELF3外周蛋白2抗體 英文名；PRPH2
CENPBD1蛋白抗體 英文名；CENPBD1外周蛋白單克隆抗體 英文名；Peripherin
CENTA2蛋白抗體 英文名；Centaurin alpha 2外周蛋白抗體 英文名；Peripherin
