丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)正在熱銷的產(chǎn)品：Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)/FITC 熒光標(biāo)記化血小板源性生長因子受體-B抗體IgG草死
Paxillin/FITC 熒光標(biāo)記樁蛋白Paxillin抗體IgG二烯草
Phospho-Paxillin (Tyr118)/FITC 熒光標(biāo)記化樁蛋白Paxillin抗體IgG1-溴-3-烷 99%
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：pyruvate kinase M2 activator 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg TEPP-46是一種有效的，選擇性的酸激酶M2(pyruvate kinase M2)的激活劑，半數(shù)激活濃度AC50值為92nM，對(duì)其他PKM1，PKL和PKR作用較小或沒有作用。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：1221186-53-3 別名：ML-265 純度：99.35% 分子量：372.46 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱：丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)
英文名稱：pyruvate kinase M2 activator
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號(hào)：FS-X10316
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
慢生根瘤菌富含亮重復(fù)蛋白25抗體Human PAPSS2 髓樣分化因子88(MyD88)
四川散斑殼白介31受體a抗體Human PAR2 髓樣分化蛋白2(MD-2)
中國擬迷孔菌LRSAM1蛋白抗體Human PARD3 髓性核分化抗原(MNDA)
波蘭青霉LIM結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human PARD6B 髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)
叢毛單胞菌乳菌菌體表面蛋白抗體Human PARN 髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)
日本根霉透明質(zhì)受體抗體Human PARD3 髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)
香菇白三烯A4水解抗體Human PARP10 (Poly [ADP-ribose] polymerase 10) 髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)
耐熱芽孢芽孢桿菌肝臟X受體抗體Human PAMR1 髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)
異常畢赤酵母溶體蛋白跨膜β4抗體Human PAN2 髓鞘蛋白P0(MPZ)
枯草芽孢桿菌富含亮重復(fù)神經(jīng)元5抗體Human BRCA1(Breast cancer type 1 susceptibility protein) 髓磷脂堿性蛋白(MBP)
蠟狀芽孢桿菌親脂性蛋白B抗體Human PANK1 髓磷脂P2蛋白(PMP2)
芽胞桿菌癌癥亮拉鏈下調(diào)因子1抗體Human PANK2 髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)
噬幾丁質(zhì)菌屬賴酰氧化相關(guān)蛋白2抗體Human PAICS(Multifunctional protein ADE2) 髓過氧化物(MPO)
湖泊黃桿菌基膜聚糖蛋白抗體Human PAGE2 性鐵蛋白(AIF)
側(cè)孢短小芽胞桿菌李斯特菌溶胞抗體Human PANK3 性神經(jīng)鞘磷脂(ASM)
少根根霉亮羧基轉(zhuǎn)移1抗體Human PAIP1 性磷(ACP)
叢毛單胞菌Comamonas│testosteroni 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)人參皂Rb2
嗜熱脂肪地芽抱桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(T)人參皂Rb1
海迪茨氏菌Dietzia│maris 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)擬人參皂F11
丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)大腸埃希氏 1-氟-3-基苯8異前列腺
釀酒酵母 1-戊基-3-氟苯8-異前列腺F2α
擬青霉 4-乙基溴骨I型膠原交聯(lián)C端頂端肽
葡萄座腔屬 鄰氨基-N,N-二甲酰Ⅰ型膠原N末端肽
黑附球 5-氨基-2-甲Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽
側(cè)孢短芽孢桿 3--5-甲氧基Ⅱ型肺泡表面抗原
總狀共頭霉 2-基Ⅱ型膠原
Lysinibacillus 3,6-二氟鄰苯二甲酐Ⅱ型膠原C端肽
硬結(jié)桿 4-羥基-四氟Ⅱ型膠原抗體
異常威克漢姆酵母 2-氨基-5-Ⅲ型膠原
空腸彎曲桿 2-溴-5-氟-3-硝基吡啶Ⅲ型前膠原氨基端肽
高山被孢霉 5-氨甲基-1,3,4-惡二唑-2-甲乙酯鹽鹽Ⅳ型膠原
紫色紅曲 3,4,5,6-四氟鄰苯二甲Agouti相關(guān)蛋白
pLVX Tre3G 三乙鹽AKT蛋白
釀酒酵母 3-溴甲AMPA離子能谷受體1
