PI3K抑制劑(Quercetin)正在熱銷的產(chǎn)品：Rabbit human IgM Whole serum 兔抗人IgM抗血清硫代硫鈉，五水 AR,99%
Rabbit human IgA Whole serum 兔抗人IgA抗血清5-氨-2-三氟苯 98%
Rabbit human IgGF(ab')2 Whole serum 兔抗人IgGF(ab')2抗血清2-氟芐溴 97%
Rabb
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
中文名稱：PI3K抑制劑(Quercetin)
英文名稱：Quercetin
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1g|5g
貨號：FS-X10458
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：Quercetin 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1g|5g Quercetin是一種天然黃酮類化合物，能夠刺激SIRT1，同時為PI3K的抑制劑，作用于PI3K γ,PI3K δ和PI3K β，IC50分別為2.4±0.6μM,3.0±0.0μM和5.4±0.3μM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：117-39-5 純度：98.21% 分子量：302.24 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
大洋芽孢桿菌腎/血管緊張形成Ren1抗體Anti-CSK Antibody(PB0129)轉(zhuǎn)鈷蛋白Ⅰ(TCN1)
枯草芽孢桿菌分泌性蛋白RSPO1抗體Anti-CST3 Antibody轉(zhuǎn)谷酰7(TGM7)
死亡谷芽孢桿菌RAS的GTP激活蛋白抗體Anti-CST3 Antibody轉(zhuǎn)谷酰6(TGM6)
異常威克漢姆酵母G蛋白P21 RAC2抗體Anti-CSTA Antibody轉(zhuǎn)谷酰5(TGM5)
玉蜀黍赤霉（麥類赤霉病菌）GTP結(jié)合蛋白RAC1+RAC2抗體Anti-CSTA Antibody筑絲蛋白5(TEKT5)
裂褶菌ras癌基因家族Rab8蛋白/原癌基因c MEL抗體Anti-CSTB Antibody筑絲蛋白4(TEKT4)
大孢長根菇ras癌基因家族Rab2抗體Anti-CSTA Antibody筑絲蛋白3(TEKT3)
苛求芽胞桿菌ras癌基因家族Rab3a抗體Anti-CSTB Antibody筑絲蛋白1(TEKT1)
解葡聚糖微桿菌ras癌基因家族Rab9蛋白抗體Anti-CSTB(Cystatin B) Antibody主要堿性蛋白(MBP)
紅褐肉座菌ras癌基因家族RAB20抗體Anti-CSTB(Cystatin B) Antibody蛛受體3(LPHN3)
蘋果黑腐皮殼菌Ras樣蛋白A+B抗體Anti-CSTB Antibody蛛受體2(LPHN2)
綠色木霉Rad51抗體Anti-CTAG1A Antibody蛛受體1(LPHN1)
黃絮鱗鵝膏菌RNA結(jié)合蛋白片段Y染色體家族蛋白2抗體Anti-CTBP1 Antibody肘臀蛋白(CUBN)
茄勞爾氏菌RNA結(jié)合蛋白片段Y染色體家族蛋白1抗體Anti-CTBP1 Antibody(PB0400)軸突生長誘向因子G2(NtnG2)
無花果曲霉變種RNA聚合III抗體Anti-CTBP2 Antibody(PB0401)軸突生長誘向因子G1(NtnG1)
土生類諾卡氏菌磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪激抗體Anti-CTCF Antibody軸突生長誘向因子5(Ntn5)
平菇Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格：0.99
紅緣層孔菌Fomes│pinicola (Sw.) Fr. 質(zhì)量規(guī)格：0.98
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格：0.98
PI3K抑制劑(Quercetin)鹿皮色曲霉 BOC-β-a-羥丁脫氫
膠孢 2--4-(三氟甲基)嘧啶脂肪結(jié)合蛋白
擬莖點霉 L-氨酰-L-亮腫瘤壞死因子配體超家族成員11
根霉 D-亮氨酰-L-酪水合物氨甲酰磷合成
槐栓 丁位壬內(nèi)酯骨特異性堿性磷
松針散斑殼 6-羧基熒光氨甲酰磷合成1
菊池鏈格孢 1-三苯甲基咪唑-4-甲頂體
黑木耳 4-三氟甲硫基苯甲酰二?；视王；D(zhuǎn)移1
卷曲鏈霉 丹磺酰肼二?；视王；D(zhuǎn)移2
厚環(huán)粘蓋牛肝 環(huán)戊二烯基雙(三苯基膦)化釕(II)富亮α2糖蛋白1
高地芽孢桿 (1,5-己二烯)化銠(I)二聚體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白3
土曲霉 2-氨基噻唑-5-羧乙酯血小板反應(yīng)蛋白;凝血敏感蛋白1
立枯絲核 N-Boc-N'-三苯甲基-L-組血小板反應(yīng)蛋白;凝血敏感蛋白
日本山茶盤孢 3，4，5-Trimethoxybenzhydrazide2,3-雙加氧1
白酒 鄰苯二甲二異丁酯 DIBP、鄰苯二 甲二丁酯 DBP、鄰苯二甲二（4- 甲基-2-戊基）酯 BMPP、鄰苯二甲 二（2-乙氧基）乙酯 DEEP、鄰苯二 甲二戊酯 DPP、鄰苯二甲二己酯 DHXP、鄰苯二甲丁基芐基酯 BBP、 鄰苯二甲二（2-丁氧基）乙酯 DBEP、鄰苯二甲二環(huán)己酯 DCHP、 鄰苯二甲二（α-乙基）己酯 DEHP、 鄰苯二甲二苯酯、鄰苯二甲二正 辛酯 DNOP、鄰苯二甲二甲酯 DMP、鄰苯二甲二乙脂（DEP） 谷鈉利塞膦鹽半五水合物CD206分子
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
