中文名稱:淀粉水解試劑
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2×10ml|2×50ml
貨號:FS-X10123
產(chǎn)品介紹:
用途: V.P試劑有效成分為萘酚,適用于腸桿菌科細菌、非發(fā)酵菌、寄養(yǎng)性細菌、厭氧菌的鑒定。 注意事項: 理是在某些微生物能將葡萄糖分解為酸,酸縮合、脫酸轉(zhuǎn)變?yōu)椋趶娝嵯潞笳吲c氧產(chǎn)生二乙酰,二乙酰與蛋白質(zhì)中的含胍基成分作用生成紅色化合物,即為V.P實驗陽性 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
假單胞菌EHM2蛋白抗體Human HIVEP2 (Transcription factor HIVEP2) 犬胰島原(PI)免疫試劑盒
雅致小克銀漢霉磷化真核翻譯起始因子4E抗體Human HCK (Tyrosine-protein kinase HCK) 犬胰島樣因子3(INSL3)免疫試劑盒
假單胞菌屬翻譯延伸因子EF-1a抗體Human HEPACAM2 (HEPACAM family member 2) 犬胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)免疫試劑盒
殼二胞屬磷化雌激受體α抗體Human CIRBP(Cold-inducible RNA-binding protein) 犬胰島樣生長因子II(IGF2)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化表皮生長因子受體抗體Human HAVCR2 (Hepatitis A virus cellular receptor 2) 犬胰島樣生長因子1(IGF1)免疫試劑盒
蒼白桿菌磷化絲裂原活化蛋白激1抗體Human HGSNAT (Heparan-alpha-glucosaminide N-acetyltransferase) 犬胰島受體β(ISR-β)免疫試劑盒
異常漢遜酵母磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體Human HYPK (Huntingtin-interacting protein K) 犬胰島(INS)免疫試劑盒
猴頭酪蛋白激受體B4抗體Human HIVEP2 (Transcription factor HIVEP2) 犬原激活肽(TAP)免疫試劑盒
亮白曲霉酪蛋白激A5受體抗體Human HEMK1 (HemK methyltransferase family member 1) 犬原-1 免疫試劑盒
孢絲蓋傘上皮鈉離子通道蛋白γ/γENaC抗體Human HCK (Tyrosine-protein kinase HCK) 犬(trypsin)免疫試劑盒
橄欖色鏈霉菌癌基因ETS2抗體Human CIRBP(Cold-inducible RNA-binding protein) 犬一氧化氮(NO)免疫試劑盒
側(cè)耳內(nèi)皮3抗體Human HYPK (Huntingtin-interacting protein K) 犬葉(FA)免疫試劑盒
華麗側(cè)耳(佛羅里達側(cè)耳)磷化外信號調(diào)節(jié)激5抗體Human HEPACAM2 (HEPACAM family member 2) 犬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒
滑菇磷化外信號調(diào)節(jié)激5抗體Human HGSNAT (Heparan-alpha-glucosaminide N-acetyltransferase) 犬血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒
野梧桐歐文氏菌外信號調(diào)節(jié)激4抗體Human HAVCR2 (Hepatitis A virus cellular receptor 2) 犬血栓B2(TXB2)免疫試劑盒
松口蘑腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體Human HNRNPM (Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein M) 犬血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99%L-半胱
: A410資源名稱: 天門冬紫鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5%維生A
: K86/39資源名稱: 新不倫瑞克沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,97%羊藿次I
淀粉水解試劑枯草芽孢桿 3-羧甲基繞丹寧果糖-1,6-二磷縮
桔青霉 1,8-萘二景天庚酮糖-1,7-二磷
滅蚊鏈霉 1,12-十二二β-碳酐
糞腸球(糞鏈球) 4-(2-甲氧基乙基)β-櫻草糖
星座鏈球星座亞種 Cbz-L-精鹽鹽Δ12-脂肪去飽和
深綠木霉 2,3-二甲氧基芐β-酮脂酰ACP合成
慢生根瘤 2-氨基-4,5-二甲氧基精合成
嗜松青霉 3--4-甲甲酯阿魏酰鄰羥基
膠孢 異丁酰碳酐
大腸埃希氏宿主 草鈣血清
美澳型核果褐腐病 L-精-L-焦谷轉(zhuǎn)運蛋白
灰略紅鏈霉 3-縮酮蛋白質(zhì)水解
棱柱散尾中華變型 N-甲基-4-番茄黃葉曲葉病
日內(nèi)瓦毛霉 甲基-1,葡萄糖二磷尿
朱紅栓 甲基乙烯基二乙氧基硅烷β-淀粉