拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ抑制劑(Etoposide)正在熱銷的產(chǎn)品：PDCD4/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白4抗體IgG三溴 AR,98%
TFAR19/PDCD5 /FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗體IgG香柏油 FMP(顯微鏡用）
PDE4D/FITC 熒光標(biāo)記二酯4D抗體IgG代十六烷 97%
PDEF/FITC 熒光標(biāo)記上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG烯酰, 96%,含~0.0
中文名稱：拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ抑制劑(Etoposide)
英文名稱：topoisomeraseⅡ inhibitor
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg
貨號：FS-X10314
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：topoisomeraseⅡ inhibitor 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg Etoposide是一種有效的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ)抑制劑，能夠抑制DNA合成。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：33419-42-0 別名：VP-16;VP-16-213 純度：99.84% 分子量：588.56 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
乳桿菌屬淺表層粘膜蛋白多糖抗體Human PCDH9 羰基化蛋白(PC)
戊糖乳桿菌調(diào)控胚胎干分化蛋白Lhx2抗體Human PCDHA2 羰基還原[NADPH] 1(CBR1/CBR/CRN)
馬紅球菌LRRC2蛋白抗體Human PBXIP1 碳酐9(CA9)
微小根毛霉神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體Human PCBD1 碳酐6(CA-6)
蟬花1-13(可訂)致盲基因LCA5樣蛋白抗體Human PCDHGC3 碳酐3(CA3)
肺形側(cè)耳(鳳尾菇)致盲基因LCA5蛋白抗體Human PCF11 碳酐2(CA-2)
假單胞菌屬轉(zhuǎn)錄因子LHX6抗體Human PCBD2 碳酐2(CA2)
絨蓋干酪菌磷化腫瘤抑制基因LATS1/LATS2抗體Human PCBP2 碳酐12(CA-12)
揚奇青霉轉(zhuǎn)錄因子LBX1抗體Human ICTP(Cross-linked C-terminal opeptide of Collagen alpha-1(I) chain) 碳酐(CA)
里氏木霉神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子LDB1抗體Human PCDH11Y 肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)
香菇白化學(xué)吸引2抗體Human PCDH11X 肽酰脯酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)
嗜線蟲致病桿菌LHX5蛋白抗體Human PCDHA3 肽聚糖識別蛋白L(PGRP-L)
松口蘑單絲蛋白激1+2抗體Human PCDHA2 肽聚糖(PG)
人參土地桿菌LIN7C蛋白抗體Human PCDH9 肽基脯酰順反異構(gòu)(PPI)
富含亮重復(fù)序列Nogo受體反應(yīng)蛋白4抗體Human PCDHGB3 胎球蛋白A(Fetuin A)
地衣芽孢桿菌富含亮α2糖蛋白抗體Human PBRM1 胎球蛋白A(FETU-A)
灰黃青霉Penicillium│griseofulvum 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)人參皂Rh2
氣單胞菌Aeromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)人參皂Rh1
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ抑制劑(Etoposide)腐皮鐮孢 1-環(huán)戊烯頻哪酯賴氨酰氧化
長枝木霉 4-丁基苯甲酰1,25-二羥基維生D3
鏈球(不定種) 6-乙?；?1,4-苯并二氧雜環(huán)1,25-二羥基維生D3
北方蜜環(huán) 4,5,6,7-四氫噻吩[3,2-c]吡啶鹽鹽1,4,5-三磷肌
枯草芽孢桿 411β羥基類固脫氫1
糙孢籃狀 R-(+)-2-(4-羥基苯氧基)乙酯16α羥基雌酮1
大腸埃希氏 2-甲基烯基17β-雌二
匍枝根霉(黑根霉) 2,3,5,6-四氟吡啶17-羥皮質(zhì)類固
假絲酵母屬 1-辛基17羥孕酮
黑柄多孔 3-溴-2-甲1-磷鞘氨
柱枝雙孢霉 3-甲硫基-1,2,4-三20-HETE
產(chǎn)黃青霉 2-溴-5-噻吩25羥基維生D
枯草芽孢桿 25羥基維生D3
谷棒桿 2--3,6-二氟2-羥雌二
大腸埃希氏 6-溴-4-喹啉3-硝基酪
