精子形態(tài)學(xué)染色液(巴氏法)正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：Nrn1/Cpg15/Neuritin 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體四丁硫氫 98%
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體四丁硫氫 離子對(duì)色譜
NGB 腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白抗體四丁溴化 98%
NeuroD1 神經(jīng)元分化因子1抗體三鹽鹽 for HPLC, ≥99.0%
Neurofascin/Nfasc155 神經(jīng)束蛋白-155三鹽鹽 99%
NT 神
中文名稱(chēng)：精子形態(tài)學(xué)染色液(巴氏法)
英文名稱(chēng)：
產(chǎn)品規(guī)格：4×20ml|4×100ml|4×500ml
貨號(hào)：FS-X9932
產(chǎn)品介紹:
用途： 用于精子形態(tài)分析，評(píng)估畸形率 注意事項(xiàng)： 本染色方法系WHO推薦Diff-Quik染色法，因精子及細(xì)胞內(nèi)不同等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)在相同的酸度下帶不同的電荷，能選擇性地結(jié)合相應(yīng)的染料而著色。 儲(chǔ)存條件：室溫，12個(gè)月 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
淡紫灰鏈霉菌骨架銜接蛋白BIN3抗體Human GEF-H1 小鼠opiorphin 免疫試劑盒
假絲酵母屬雙向染色體分裂蛋白1抗體Human GDPD5 小鼠N-乙?；?絲酰-天門(mén)冬酰-賴(lài)酰-脯(AcSDKP)免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體Brn3αHuman GFPT1 小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖(NAG)免疫試劑盒
泡盛曲霉骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體Human GDPD2 小鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒
磚紅鐮孢菌腦鈉抗體Human GEFT 小鼠NANOG同源域蛋白(NANOG)免疫試劑盒
猴假單胞菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體Human GEM 小鼠NAD依賴(lài)性蛋白脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)免疫試劑盒
毛柄金錢(qián)菌(金針菇)抑凋亡基因bag1抗體Human GEMIN5 小鼠NADPH氧化1(NOX1)免疫試劑盒
阿魏側(cè)耳蛙皮受體3抗體Human GEMIN4 小鼠M型肌激(CKM)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體Human GEMIN6 小鼠MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)免疫試劑盒
牡丹擬盤(pán)多毛孢菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體Human GEMIN7 小鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)免疫試劑盒
黑曲霉磷化Bcl-2抗體Human GEMIN4 小鼠L-乳脫氫A鏈(LDH-A)免疫試劑盒
植物乳桿菌磷化Bcl-2抗體Human GDAP2 小鼠L解(PAL)免疫試劑盒
谷棒桿菌磷化Bcl-xL蛋白抗體Human GDAP1L1 小鼠Klotho 免疫試劑盒
大腸埃希氏菌神經(jīng)母瘤相關(guān)蛋白ARID3B抗體Human GDE1 小鼠KI-67抗原(MKI67)免疫試劑盒
凍干粉 產(chǎn)腸大腸埃希氏菌（陽(yáng)性） 微管蛋白β4抗體Human GDAP1L1 小鼠I型膠原蛋白免疫試劑盒
光滑青霉霍亂腸β鏈抗體Human GBP4 小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒
考克氏菌Kocuria│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BRβ2糖蛋白試劑盒芹糖異甘草
匍枝根霉Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格：BRβ1腎上腺能受體試劑盒芹菜-7-0-（2G-鼠李糖）龍膽糖
土曲霉原變種Aspergillus│terreus var. terreus 質(zhì)量規(guī)格：>98% (HPLC),BCβ1,4-N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移2試劑盒5-羥色
精子形態(tài)學(xué)染色液(巴氏法)葉生布勒擔(dān)子酵母 雜氮雙環(huán)磷酯葡糖氨基聚糖
谷棒桿 3-乙?；?6-咪唑并[1,2-B]噠多配體聚糖-1
大腸埃希氏 抗氧劑 LK-1081Ras三磷鳥(niǎo)激活樣蛋白
柔嫩艾美耳球蟲(chóng) 2--4-肼血管抑
Methylobacterium variabile 3-乙氧基苯吡啶并林
金耳 2,3-二甲氧基磷脂酰肌抗體
DB (彌漫大B瘤) (通過(guò)STR鑒定） 8-氨基-6-甲氧基喹啉抗磷脂酰絲凝血原復(fù)合物IgG抗體
炭疽芽胞桿 聚乙烯肉桂酯抗磷脂酰絲凝血原復(fù)合物IgM抗體
*蛹蟲(chóng)草 肉堿富馬鹽凝血IgG抗體
離中不粘柄 3--5-氟芐凝血IgM抗體
海洋沉積物芽孢桿 3,5-二氟苯布魯氏桿IgG抗體
彎曲假單胞 N-甲基-3-氟芐布魯氏桿IgM抗體
果生鏈核盤(pán) (3S,4S)-1-芐基吡咯烷-3,4-二布魯氏桿IgA抗體
芽胞桿 2-羥基-2-甲基-N-[4-基--3-(三氟甲基)苯基]-3-[4-(氟苯基)硫]酰B瘤因子3
生黑鏈霉 1,2-環(huán)氧-2-甲基-N-[4-基--3-(三氟甲基)苯基]-烯酰肝配蛋白A1
