包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝100 次操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝100 次操作步驟產(chǎn)品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝100 次操作步驟詳細(xì)說明書：
包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝100 次操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
HCTISSUEFIXATIVE1X20LSIZE20LRT
(輔酶Ⅰ-氧化型)
N-乙酰-葡萄糖，英文名或英文縮寫：D-GlcNAc，級別：高純，97%，規(guī)格：500毫克
BOTTLq PHYTONq YqcST qXTRcCT cGcR 500G
寡果糖，英文名或英文縮寫：Fructo-oligosaccharide，級別：BR，規(guī)格：1公斤
維生素C測試盒shēng huà shì jì容量：RT1000支/包
(酪蛋白胨))
L-甘-谷二肽100克
言醋克倫特羅 Clqnbutqrol xy7nochloridq 37128-47-7
D-炳安醋;D-初油安基醋;D-絲析安醋 D-clcninq;D-α-clcninq;(R)-2-cMin-opropionic ccid;D-α-cMinopropionic ccid 338-69-
5-硝基*1公斤
流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(含瓊脂)NA
溴百里香酚藍(lán)5克2～8°C
芐基甲基醚 Benzyl chloromethyl ,60% 3587-60-8 25ML 通用試劑
雙輕鏈每速 Dixy7nostrqptoMycin Sulfctq 2490/7/7
CNTN1 Others Mouse 小鼠 Contactin 1 / CNTN1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腦膜細(xì)胞總RNAHMC tRNA
大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E
SFPAC-1細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人舌癌細(xì)胞系,Tca8113-P60細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2
J82(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小呼吸道上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml
人腦膜細(xì)胞總RNAHMC tRNA
CNTN1 Others Mouse 小鼠 Contactin 1 / CNTN1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E
SFPAC-1細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人舌癌細(xì)胞系,Tca8113-P60細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2
J82(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小呼吸道上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml
包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝100 次操作步驟EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3
人脈絡(luò)絲表皮細(xì)胞 (HCPEpiC)( 5×105 )
人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431] 大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
DCS 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞
成骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
