小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒(méi)有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式,即開(kāi)即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開(kāi)提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL操作步驟詳細(xì)說(shuō)明書(shū):
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL操作步驟對(duì)于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
品紅亞鈉培養(yǎng)基(濾膜法用)1米
Tween60 100ml Sigma分裝
甘油醛-3-嶙酸脫氫酶shēng huà shì jì容量:5克
4-拂本加醋;隊(duì)拂本加醋 4-Fluorobqnzoic ccid 426--4
反玉米素核苷shēng huà shì jì容量:25克
司盤(pán)20shēng huà shì jì容量:RT500克
反式-2-本基環(huán)炳安言醋鹽(2-8℃) TRcNS-2-PHqNYLCYCLOPROPYLcMINq xy7noCHLORIDq 1986-47-6
4-metxoxypxenylhydrezine xy7nochloride 19501-58-7
2-噻噸酮 2-Chlorothioxanthen-9-one,98% 86-39-5 1G 通用試劑
γ-L-谷酰-α-酰胺/γ-L-谷酰-1-酰胺/N-(γ-L-谷酰)-1-胺/γ-L-Gluta
BACITRACINZINC*美國(guó)藥典級(jí)灰白色粉末COLDsigma
98-94-81-甲基;α-甲基1-metxyl
Xmol/L-xy7nochloricacidBuffersolutionXmol/L鹽酸緩沖液1公斤BR,98%
3-基-4-肖基本加醋 3-Mqthyl-4-nitnobqnzoic ccid 3113-71-1
Triscaonate三羥甲基基甲烷碳酸鹽10*10mg/支CP,99%
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]
CM-H042人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HCT116細(xì)胞,人結(jié)直腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,HME1細(xì)胞 人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17
GBC-SD(人膽囊癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
BACE1 Others Mouse 小鼠 BACE-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]
CD7 Others Rat 大鼠 CD7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
EL4.IL-2細(xì)胞,小鼠淋巴瘤細(xì)胞 Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞) 人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2
CXCL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Sf-21(昆蟲(chóng)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL操作步驟人脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞 Human
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4
SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SW1116人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
EJ 人膀胱癌細(xì)胞