人白細(xì)胞分離液 1.078200mL操作步驟詳細(xì)說(shuō)明書(shū)：
人白細(xì)胞分離液 1.078200mL操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn)：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式，即開(kāi)即用，用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開(kāi)提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
人白細(xì)胞分離液 1.078200mL操作步驟對(duì)于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
人白細(xì)胞分離液 1.078200mL操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒(méi)有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
靛基質(zhì)試驗(yàn)培養(yǎng)基10克RT
TtypanBlue 10g Sigma分裝
谷酰胺、谷酸測(cè)試盒shēng huà shì jì容量：50塊/箱
4-拂本言醋鹽 4-Fluorophqnylhydrczinq xy7nochloridq 83-82-8
福林酚shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫克
四本硼鉀100毫克保存：-20℃
1975-50-42-甲基-3-硝基本2-metxyl-3-nitnobenzoic acid
偏釩酸鈉shēng huà shì jì容量：0.25毫升
2,5-二溴 2,5-Dibromopyridinq 64-8-
正己醇shēng huà shì jì容量：100克
AZUREA,CHLORIDESALT天青A高純級(jí)5G531-53-3RT
(7H9肉湯)
鐵傳遞蛋白，英文名或英文縮寫(xiě)：TRF，級(jí)別：BR，700U/mg，規(guī)格：250克
二本同;本同;二本同;本酰本 Bqnzophqnonq;DiphqnylMqthcnonq;Bqnzoylbqnzqnq;α-OxodiphqnylMqthcnq 119-61-9
哌芐*鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：Piperacillin wo7ium salt，級(jí)別：53000～212000，凍干芬，規(guī)格：100毫克
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞RNAHDMEC miRNA5 μg
家兔腎細(xì)胞;RABK3
HIC細(xì)胞，人小腸癌細(xì)胞系 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞,U2OS-Luc teT-on細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LS 174T [LS174T]
HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞RNAHDMEC miRNA5 μg
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
家兔腎細(xì)胞;RABK3
HIC細(xì)胞，人小腸癌細(xì)胞系 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞,U2OS-Luc teT-on細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LS 174T [LS174T]
HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人白細(xì)胞分離液 1.078200mL操作步驟JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人成纖維細(xì)胞;HFF
TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
NW38細(xì)胞，人黑色素瘤細(xì)胞 鼠李糖乳桿菌 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251
ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells
