活細胞/死細胞雙染試劑盒500T售后服務使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
活細胞/死細胞雙染試劑盒500T售后服務操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
活細胞/死細胞雙染試劑盒500T售后服務實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
BxPC-3(人原位胰腺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0005293T(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人細胞裂解液 (陽性對照)
KB/V細胞,人口腔上皮癌長春新堿耐藥株 人血管內皮細胞,EC-304細胞 大鼠骨髓瘤細胞;Y3-Ag 1.2.3
大鼠肝癌細胞;CBRH-7919 [CBRH7919]
CNTN3 Others Human 人 CNTN3 / Contactin-3 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2
IL18R1 Others Rat 大鼠 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照)
膀胱癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
PAN-1細胞,胰腺導管上皮癌細胞 人細胞,HeLa-S3細胞 人小腦顆粒細胞總RNAHCGC tRNA
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7
GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV gB 人細胞裂解液 (陽性對照)
PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照)
氣道平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
正常小鼠Leydig細胞;TM3
LTEP-sm細胞,人小細胞肺癌細胞 小鼠皮膚細胞,JB6-C41細胞 CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內皮細胞)5×106cells/瓶×2
TE-1(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2
HUtMEC-c 人子宮微血管內皮細胞(HUtMEC) 500,000cells 臍靜脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒 ,英文名: AQP-4 ELISA Kit
人血清一氧化氮(NO)ELISA檢測試劑盒Humannitricoxide,NOELISAKit 96T/48T
蝌蚪雌二醇(E2)免疫試劑盒 Tadpole Estradiol,E2 ELISA kit
CLIAKitforPPAR-Gamma(HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorGamma)ELISAKit人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ規(guī)格:48T/96T
石蠟切片組織IKB-ALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
ELISAKitSP-C人肺表面活性物質相關蛋白C規(guī)格:48T/96T
小鼠骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human growth hormone binding protein (GHBP) ELISA Kit 人生長激素結合蛋白(GHBP)ELISA試劑盒
HumanSecretinELISAKit 人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-respiratorysyncytialvirusantibody,RSVELISA試劑盒人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
HumanTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit人壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
活細胞/死細胞雙染試劑盒500T售后服務小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝