活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
BT-549(人管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CL-0013A2780(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

KB細(xì)胞，人口腔表皮樣癌細(xì)胞 人血管內(nèi)皮細(xì)胞,VE細(xì)胞 大鼠肝癌細(xì)胞;RH-35

大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3

CNTN3 Others Human 人 CNTN3 / Contactin-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
原代骨細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml

IL18R1 Others Rat 大鼠 IL18R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

HCT-8 [HRT-18]人回盲腸癌細(xì)胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells 1640+10% FBS

IFNG Protein Rat 重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14) 5×106cells/瓶×2 CHO(中國倉鼠卵巢細(xì)胞)
KLK8 Others Human 人 KLK-8 / Kallikrein-8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

氣道平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

PIEC 豬髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞

兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTF

Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞

人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823 大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠白介素13(IL13)ELISA試劑盒 ，英文名： IL13 ELISA Kit

人血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA檢測試劑盒Human50%complementhemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T

大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)免疫試劑盒 Rat A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit

英文名稱RatMGα1ELISAKit大鼠α1微球蛋白(MGα1)規(guī)格：96T/48T

咖啡環(huán)氨酸(cyclamate)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20次

ELISAKitFK人趨化因子規(guī)格：48T/96T
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human growth regulated oncogene beta / melanoma growth stimulating factor (GRO beta /CXCL 人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL

HumanvisfatinELISAKit 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humananti-redcellantibodyELISA試劑盒人抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細(xì)胞葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次

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