產(chǎn)品名稱：Caspase 3 活性檢測試劑盒100T售后服務(wù)
儲存條件：裂解緩沖液和檢測液室溫保存；其他-20℃避光保存。
有效期：一年。
產(chǎn)品簡介：
Caspase3活性檢測試劑盒(Caspase3ActivityAssayKit)是采用分光光度法檢測細(xì)胞或組織裂解液中Caspase3酶活性或純化的Caspase3酶活性的試劑盒。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是一個在細(xì)胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase3也稱CPP32、Yama或apopain，有時被寫作caspase-3或caspase3，屬于caspase家族的CED-3亞家族(CED-3subfamily)，是細(xì)胞凋亡過程中的一個關(guān)鍵酶。Caspase3是哺乳動物細(xì)胞中研究多的一個caspase。Caspase-3在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中，沒有活性；但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段，Caspase-3被激活，活化的Caspase-3由兩個大亞基和兩個小亞基組成，裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物，終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase3可以剪切procaspase3、6、7和9，并可以直接特異性剪切許多caspase底物，包括PARP，ICAD，gelsolin和fodrin等。這些由caspase3介導(dǎo)的蛋白剪切是細(xì)胞凋亡分子機制的重要組成部分。
Caspase 3 活性檢測試劑盒100T售后服務(wù)使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
Caspase 3 活性檢測試劑盒100T售后服務(wù)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Caspase 3 活性檢測試劑盒100T售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
柚Citrus maxima Nootkatone 努特卡酮;諾卡酮,圓柚酮 4674-50-4 C15H22O ≥98%
棕櫚醋酯Pclmiticccidqthylqstqr68-97-720mg
鱧腸Eclipta prostrata alpha-Terthienylmetxanol alpha-三聯(lián)噻吩 13059-93-3 C13H10OS3 茶本海明(100120
中藥對照藥材路邊青121227-200503TLC法鑒別
Berbamine xy7nochloride*純度：≥98%
10191-41-0 維生素E標(biāo)準(zhǔn)品(250mg) 500mg
楊梅苷;楊梅甙;五羥基皇同-3-數(shù)李YangMeigan;YangMeidai;fivexy7noxyflavone-3-ShuLiMyricetriHPLC≥98%,20mg/支
Bi-linderone BI-LINDERONE 1227375-09-8
嘧啶并三唑類磺胺 標(biāo)準(zhǔn)品 號：219714-96-2 1ml
人參皂苷 Rg4 126223-28-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
烈香杜鵑 Rhododendron anthopogonoides 1g
紫杉葉3-O數(shù)李基醋酯Rhamnusmetxylesteryewleaves3-O9838-67-3HPLC≥98%，20mg/vial
5,7-Dixy7noxy-6,8-dimetxoxyflavone 5,7-DIxy7noXY-6,8-DImetxOXYFLAVONE 3162-45-6
UV法含量測定D-葡萄糖醛酸140648-200602常溫，避光100mg
異佛手柑內(nèi)酯 Isobergapten 482-48-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
9（R）-HODE （50 ug） 9R-xy7noxy-10E，12Z-octadecadienoic acid； 9（R）-HODE
MA-CHMINACA （1 mg） AB-CHMINACA|AMB N-metxylcyclohexyl analog|MAB-AB-CHMINACA； metxyl （1-（cyclohexylmetxyl）-1H-indazole-3-carbonyl）-L-valinate
Annexin V-iFluor 350偶聯(lián)物 Annexin V-iFluor 350 conjugate
Docosaenoyl Ethanolamide （5 mg） N-（2-xy7noxyetxyl）-13Z-docosenamide； Docosaenoyl Ethanolamide
α-Linolenic Acid （1 g） 9Z，12Z，15Z-octadecatrienoic acid； ALA； α-Linolenic Acid
4-（3-Ethenyl-3，7-dimetxyl-1，6-octadienyl）pxenol Bakuchiol
G-QGly-Gln
α-Mating Factor (1-6)Trp-His-Trp-Leu-Gln-Leu
[Nle4,DPhe7] a-MSH, amide;Melanotan ⅠAc-Ser-Tyr-Ser-Nle-Glu-His-D-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-NH2
Biotin-Obestatin (human)Biotin-Phe-Asn-Ala-Pro-Phe-Asp-Val-Gly-Ile-Lys-Leu-Ser-Gly-Val-Gln-Tyr-Gln-Gln-His-Ser-Gln-Ala-Leu-NH2
P69 (522-534), M. lepraePro-Glu-Lys-Thr-Ala-Ala-Pro-Ala-Ser-Asp-Pro-Thr-
Caspase 3 活性檢測試劑盒100T售后服務(wù)錄本ChlorobenzeneAR500mL
G8140-5MLGoldview5ml0
CG5611-1Gγ-Globulins(From Bovine) γ-球蛋白(牛)9007-83-41g
2xPCRmix GC-Rich Master1ml(with Dye)
亮抑酶肽5mg
