細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒100T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒100T使用說明書
儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期： 一年。

產(chǎn)品簡介：

細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒可用于細(xì)胞凋亡檢測，也可用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細(xì)胞儀檢測。本試劑盒細(xì)胞染料是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。能少許進(jìn)入正常細(xì)胞膜，使其染上低藍(lán)色，而凋亡細(xì)胞的膜通透性增強(qiáng)，因此進(jìn)入凋亡細(xì)胞中的染料比正常細(xì)胞的多，熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞中要高，此外，凋亡細(xì)胞的染色體DNA的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA結(jié)合，并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將染料排出到細(xì)胞外使之在細(xì)胞內(nèi)積累增加等都使凋亡細(xì)胞的藍(lán)色熒光增強(qiáng)。染料的大激發(fā)波長為346nm，大發(fā)射波長為460nm；染料和雙鏈DNA結(jié)合后，大激發(fā)波長為350nm，大發(fā)射波長為461nm。本染色試劑盒可直接用于活細(xì)胞或組織染色，也可用于固定細(xì)胞或組織染色。

細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒100T使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒100T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
狼牙刺Sophora viciifolia Neosophoramine 新槐胺 52932-74-8 C15H20N2O ≥98%

正丁基本酞Butylphthclidq6066-49-220mg

鹽膚木Rhus chinensis 3',4',7-Trimetxoxyflavan 3',4',7-*氧基黃烷 116384-26-0 C18H20O4 單元素鋱溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080569

檢查用枸椽酸*E-異構(gòu)體100316-200402常溫，避光30mg

鯡魚油標(biāo)準(zhǔn)品2ml
04-93-9 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 4vials

萊苞迪甙A;萊苞迪苷ALaibractrebaudiosideA;LaibractDiglycosideA28243-16-1HPLC≥98%,10mg/支

erythro-1-(4-xy7noxy- 3-metxoxypxenyl)propane-1,2-diol 1280602-81-4

右旋安非他命相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品625mg

甲氧醉椒素 500-62-0 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
白術(shù)內(nèi)酯I 73069-13-3 檢測用對(duì)照品 蒼術(shù)內(nèi)酯I

紫玉蘭Magnolia liliflora Maglifloenone 心夷烯同 82427-77-8 C22H26O6 變形鋁合金成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(G02220

對(duì)照品次野鳶尾黃素111557-200101含量測定

Azaperone阿扎哌隆標(biāo)準(zhǔn)品1649-18-9200mg阿扎哌隆標(biāo)準(zhǔn)品

南美蟛蜞菊Wedelia trilobata Grandiflorenic acid 貝殼二烯酸 22338-67-6 C20H28O2 ≥95%
5（S）-HETrE （100 ug）     5S-xy7noxy-6E，8Z，11Z-eicosatrienoic acid； 5（S）-HETrE

（S）-Ketoprofen （1 g）     （S）-2-（3-benzoylpxenyl）Propionic Acid|Dexketoprofen； （S）-3-benzoyl-α-metxyl-benzeneacetic acid

mFluor Red 780-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     mFluor Red 780-streptavidin conjugate 1 mg/ml

α-Piperidinobutiopxenone （xy7nochloride） （10 mg）     1-pxenyl-2-（1-piperidinyl）-1-butenone， monoxy7nochloride； α-Piperidinobutiopxenone （xy7nochloride）

Docosatrienoic Acid （10 mg）     13Z，16Z，19Z-docosatrienoic acid； Docosatrienoic Acid

D-（     Ampicillin wo7ium
Glycogen Synthase-derived peptideLys-Lys-Leu-Asn-Arg-Thr-Leu-Ser-Val-Ala

α-Calcitonin Gene Related Peptide, humanAla-Cys-Asp-Thr-Ala-Thr-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (Disulfide bridge Cys2-Cys7)

[Lys6] Leu-EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Lys

Biotin-Gastrin (1-17)Biotin-Glu-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2

Osteostatin amide (human)Thr-Arg-Ser-Ala-Trp-Leu-Asp-Ser-Gly-Val-Thr-Gly-Ser-Gly-Leu-Glu-Gly-Asp-His-Leu-Ser-Asp-Thr-Ser-Thr-Thr-Ser-Leu-Glu-Leu-Asp-Ser-Arg-NH2
細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒100T使用說明書1,1,1-三錄乙烷1,1,1-TrichloroethaneCP500mL

CA1151-5g鹽酸吖啶黃8063-24-95g0

C0130-100mgCollagenaseⅠ 膠原酶Ⅰ9001-12-1100mg

Stool DNA Kit100T

L-(+)-Arabinose100g