產(chǎn)品名稱:正常細胞、凋亡細胞與壞死細胞檢測試劑盒售后服務
儲存條件:-20℃避光保存。避免反復凍融。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
正常細胞/凋亡細胞/壞死細胞檢測試劑盒是采用DNA探針雙染細胞核的方法檢測細胞的狀態(tài)。染色液A可以透過正常細胞膜,而細胞凋亡后,細胞膜對染色液A的通透性增加,染色液B不能透過細胞膜,對正常細胞和凋亡細胞不能染色,而對壞死細胞可以染色。用兩種染色液對細胞進行雙染后,使用流式細胞儀或熒光顯微鏡即可對細胞狀態(tài)進行檢測。在雙變量流式細胞儀的散點圖上,這三群細胞表現(xiàn)分別為:正常細胞為低藍色/低紅色(A+/B+),凋亡細胞為高藍色/低紅色(A++/B+),壞死細胞為低藍色/高紅色(A+/B++)。
正常細胞、凋亡細胞與壞死細胞檢測試劑盒售后服務使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體 豬胰島素原(PI)ELISA Kit Pig Proinsulin,PI ELISA Kit
磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 豬胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)ELISA Kit Pig insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit
磷酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 豬*(Trypsin)ELISA Kit Pig Trypsin ELISA Kit
磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體 豬氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)ELISA Kit Pig peroxiredoxin 2,PRDX2 ELISA kit
磷酸化ATR抗體 豬血栓素A2(TXA2)ELISA Kit Pig Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit
細胞核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體 豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA Kit Pig serum amyloid A,SAA ELISA Kit
天*連接糖基化11抗體 豬血漿*(KLKB1)ELISA Kit Pig plasma kallikrein,KLKB1 ELISA Kit
細胞衰老相關蛋白ASF1A抗體 豬血紅蛋白(Hb)ELISA Kit Pig hemoglobin,Hb ELISA Kit
氨基糖苷類磷酸結構域蛋白抗體 豬血管舒緩激肽(BK)ELISA Kit Pig Bradykinin,BK ELISA Kit
唾液酸糖蛋白受體1抗體 豬血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1)ELISA Kit Porcine Vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA Kit
芳香基硫酸酯酶F抗體 豬血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA Kit Pig Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA KIT
A激酶錨定蛋白5抗體 豬血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA Kit Pig Angiotensin converting enzyme 2,ACE2 ELISA Kit
小腦脊髓共濟失調(diào)蛋白3抗體 豬血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA Kit Pig Angiotensin Converting Enzyme,ACE ELISA Kit
ASTE1蛋白抗體 豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA Kit Pig angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
磷酸化自噬相關蛋白4B抗體 豬血管活性腸肽(VIP)ELISA Kit Pig Vasoactive Intestinal Peptide,VIP ELISA Kit
微絲相關蛋白1抗體 豬旋毛蟲IgG抗體(Trichinella IgG Ab)ELISA Kit Pig Trichinella IgG antibody ELISA Kit
腺苷A1A受體抗體 豬*β4(Thymosin β4)ELISA Kit Pig Thymosin β4 ELISA Kit
芳基硫酸酯酶B抗體 豬心型脂肪酸結合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)ELISA Kit Pig Fatty acid-binding protein, heart,FABP3 ELISA kit
γ氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶抗體 豬心鈉肽(ANP)ELISA Kit Pig Atrial Natriuretic Peptide,ANP ELISA Kit
共濟失調(diào)蛋白2結合蛋白1抗體 豬心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA Kit Pig cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISA Kit
Calponin鈣調(diào)節(jié)蛋白 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Calretinin (CR)鈣結合蛋白1:150-200 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Caspase3 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Caspase8 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Caspase9 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD3 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD4 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD5 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD10 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD19(frozen) 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD20 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD22 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD25 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD29 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD30 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD31 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD34 1:200 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD41 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD43 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD45/T200/LCA 1:200 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD45RA 1:150 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD45RO 1:150 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD68 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD79 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD81 濃縮液 0.1ml 進口分裝
CD95(冰凍) 濃縮液 0.1ml 進口分裝