小鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：63902-38-5二 規(guī)格： 20mg
470-37-1華基 規(guī)格： 20mg
6035-49-0白蠟樹;Dimethylfraxeti 規(guī)格： 20mg
羅非班 規(guī)格： 100mg
尿 規(guī)格： 50mg
119188-47-510-羥基攀援山橙 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
41753-43-9人參皂Rb1 規(guī)格： 20mg
55916-51-3重樓
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
分類 | 原代細(xì)胞 |
貨號 | GOY-01X1226 |
商品介紹：
名稱 小鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞 2.組織來源：淋巴結(jié) 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞分離自淋巴結(jié)；淋巴結(jié)是哺乳類*的周圍淋巴器官，由淋巴細(xì)胞集合而成。呈豆形，位于淋巴管行進(jìn)途中，是產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要器官之一。淋巴結(jié)表面包有被膜，被膜的結(jié)締組織伸入淋巴結(jié)內(nèi)形成小梁，構(gòu)成淋巴結(jié)的支架。被膜下為皮質(zhì)區(qū)，淋巴結(jié)的中心及門部為髓質(zhì)區(qū)。皮質(zhì)區(qū)有淋巴小結(jié)、彌散淋巴組織和皮質(zhì)淋巴竇（簡稱皮竇），髓質(zhì)包括由致密淋巴組織構(gòu)成的髓索和髓質(zhì)淋巴竇（簡稱髓竇）。淋巴竇的竇腔內(nèi)有許多淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，從輸入淋巴管流來的淋巴液先進(jìn)入皮竇再流向髓竇，最后經(jīng)輸出淋巴管離開淋巴結(jié)。淋巴結(jié)的主要功能是濾過淋巴液，產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞，參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。淋巴結(jié)腫大或疼痛常表示其屬區(qū)范圍內(nèi)的器官有炎癥或其他病變。主要功能是濾過淋巴液，產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞，參與機(jī)體的免疫反應(yīng)；當(dāng)局部感染時(shí)，細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入，引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們，則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞是白細(xì)胞的一種，由次級淋巴器官淋巴結(jié)產(chǎn)生，是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分；細(xì)胞為圓形細(xì)胞核，細(xì)胞質(zhì)少。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖，繼而發(fā)揮其免疫功能。 5.方法簡介： ()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞采用分離淋巴結(jié)組織、研磨獲取單細(xì)胞懸液后通過密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： ()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M180 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細(xì)胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
大腸桿菌/大腸菌群液體顯色培養(yǎng)基 E.Coli/Coliform Broth Chromogenic Medium 1000ml
1 管 Novablue(DE3)大腸桿菌 Novablue(DE3) E.coli Strain -80℃保存
2 ug pRNATin-H1.2/Retro pRNATin-H1.2/Retro 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
50次 柱式血液RNAout Column Blood RNAOUT 4℃保存
2 ug pcDNA4/HisMax B pcDNA4/HisMax B 低?嵌?L?
小鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞PPP2R1B 蛋白質(zhì)磷酸2調(diào)節(jié)亞基1B抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr157) 磷酸化P27抗體/周期素依賴激抑制劑抗體 規(guī)格: 0.1ml
ERCC6L 發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體（乙醇致畸因子） 規(guī)格: 0.2ml
SEN1/ 細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
SMC5 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml
BKCA alpha 鈣激活鉀通道蛋白α抗體 0.2ml
RNF87 環(huán)指蛋白87 規(guī)格: 0.2ml
Ribonuclease Inhibitor 核糖核酸抑制因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-eIF4E(Ser209) 磷酸化真核翻譯起始因子4E抗體 規(guī)格: 0.1ml
BIN2/BRAP1 相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
GFRAL 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
2 ug pACT2 AD pACT2 AD 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
