產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    NK細胞

NK細胞確切的來源還不十分清楚，一般認為直接從骨髓中衍生，其發(fā)育成熟依賴于骨髓的微環(huán)境。小鼠和人的體外實驗表明，胸腺細胞在體外IL-2等細胞因子存在條件下培養(yǎng)也可誘導出NK細胞。小鼠脾臟在體內(nèi)IL-3誘導下可促進NK細胞的分化。NK細胞主要分布于外周血中，占PBMC5～10%，淋巴結(jié)和骨髓中也有NK活性，但水平較外周血低。

由于NK細胞具有部分T細胞分化抗原，如80～90%NK細胞CD2+，20～30%NK細胞CD3+（表達CD3ζ鏈），30%NK細胞CD8+（α/α）和75～90%NK細胞CD38+，而且NK細胞具有IL-2中親和性受體，在IL-2刺激下可發(fā)生增殖反應，活化NK細胞可產(chǎn)生IFN-γ，因此一般認為NK細胞與T細胞在發(fā)育上關系更為密切。

與T細胞、B細胞相比，NK細胞表面標志的特異性是相對的。人NK細胞mIg-，部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性，表達IL-2受體β鏈(P75、CD122），CD11b/CD18陽性。常用檢測NK細胞的標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。

一種穩(wěn)定表達在NK和LAK細胞表面的LAK-1分子，120kDa，NK細胞在IL-2條件下培養(yǎng)20天LAK-1仍為陽性，而HNK-1(CD57）和CD16部分消失。LAK的殺傷活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。

NK細胞活化途徑：

1、通過CD3分子的ζ鏈

NK細胞不表達TCR/CD3復合物，但部分NK細胞表達CD3ζ鏈，當用CD16抗體刺激NK細胞活化時，ζ鏈發(fā)生磷酸化，引起胞漿內(nèi)Ca2+濃度升高，IP3水平增加，促進細胞因子合成和ADCC作用。

2、通過CD2分子

CD2與CD58相互作用或用CD2McAb刺激可活化NK細胞，CD3ζ鏈發(fā)生磷酸化。

3、自然殺傷細胞刺激因子

自然殺傷細胞刺激因子（natural killer cell stimulatory factor，NKSF)對NK細胞有刺激作用。

IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白細胞調(diào)節(jié)素(leukoregulin，LR)對NK細胞的活化和分化有正調(diào)節(jié)作用，體外培養(yǎng)時加入上述細胞因子可明顯提高NK的殺傷活性。前列腺素(PG)E1、E2、D2和腎上腺皮質(zhì)激素等對NK細胞的活性有抑制作用。

NK細胞表面具有IL-2中親和性受體，IL-2誘導NK的殺傷活性約需18-24小時。此外，IL-2還可誘導NK細胞的增殖，一般在刺激后3～4天開始發(fā)生增殖，其機理為IL-2可誘導NK細胞表達IL-2Rα鏈，新表達的α鏈與原先細胞表面的β鏈和γ鏈結(jié)合形成高親和性受體，在IL-2存在下刺激NK細胞發(fā)生增殖。IL-2誘導NK細胞的活性機理尚不清楚，可能與增加細胞粘附分子的表達，提高對NK抵抗靶細胞的殺傷活性有關，還可能增加NK細胞胞漿中的顆粒以及酯酶mRNA的表達，活化和促進殺傷介質(zhì)的殺傷作用。

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

人體TNF-βRFLP基因分析試劑盒  20次

Borrelia burgdorferi RFLP基因分析試劑盒  20次

Toxoplasma gondii RFLP基因分析試劑盒  20次

Trypanosoma congolense RFLP基因分析試劑盒  20次

Hepatitis B virus RFLP基因分析試劑盒  20次

Human cytomegalovirus （HCMV）RFLP基因分析試劑盒  20次

human herpesviruses RFLP基因分析試劑盒  20次

C

NK細胞酸性L-G培養(yǎng)基基礎進口、國產(chǎn)Acid L-G medium Base適用于堿性物質(zhì)處理的結(jié)核桿菌標本250山羊toll樣受體2(TLR2)免疫試劑盒進口、分裝

堿性L-G培養(yǎng)基基礎進口、國產(chǎn)Alkaline L-G medium Base適用于酸性物質(zhì)處理的結(jié)核桿菌標本250山羊M型肌酸激(CKM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

TCH（噻吩-2-羧酸酰肼）進口、國產(chǎn)加入改良羅氏培養(yǎng)基中制成TCH培養(yǎng)基，用于分枝桿菌鑒定0.1山羊C型鈉尿肽(CNP)免疫試劑盒*直銷

戊烷脒B瓊脂基礎進口、國產(chǎn)用于炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定250山羊C反應蛋白(CRP)免疫試劑盒進口、組裝

鈉瓊脂基礎進口、國產(chǎn)用于炭疽桿菌的莢膜培養(yǎng)250山羊CD14分子(CDl4)免疫試劑盒進口、分裝

指示選擇性培養(yǎng)基基礎進口、國產(chǎn)用于炭疽桿菌的分離鑒別250山羊Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

PLET 瓊脂基礎進口、國產(chǎn)PLET Agar Base用于炭疽桿菌的分離鑒別250人左右不對稱發(fā)育因子2(LEFTY2)免疫試劑盒進口、組裝

戊烷脒進口、國產(chǎn)加入戊烷脒瓊脂50mg人左旋肉堿/L-肉堿 免疫試劑盒進口、分裝

炭疽桿菌疫苗進口、國產(chǎn)炭疽桿菌檢測用配套試劑50人份/5支人組織因子途徑抑制物-2(TFPI-2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

炭疽桿菌沉淀血清進口、國產(chǎn)炭疽桿菌檢測用配套試劑1ml人組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒*直銷

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。